[发明专利]一种从虎杖中提取虎杖苷和白藜芦醇的HPLC检测方法

权利要求书

1.一种从虎杖中提取虎杖苷和白藜芦醇的HPLC检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)供试品溶液的制备

称取虎杖粉末，精密称定，置于干燥具塞锥形瓶中；精密移取甲醇，称定重量，超声处理30min；取出，放冷至室温后，用甲醇补回失去的重量；过滤，取续滤液，即得供试品；

2)高效液相色谱分析

色谱柱：Phenomenex5μm EVO C18(250mm×4.6mm，5μm)；

柱温：25℃；

检测波长：306nm；

流动相：乙腈-水(23：77)，等度洗脱；

流速：1mL/min；

进样量：10μL。

2.根据权利要求1所述的从虎杖中提取白藜芦醇的HPLC检测方法，其特征在于：步骤2)中，所述高效液相色谱分析的条件包括：采用反相填料色谱柱；检测波长为306nm以及全波长扫描，流速为0.8～1.2ml/min，进样量为2～20μl，柱温为20～35℃，流动相为乙腈-水及其他，等度洗脱。

3.根据权利要求1所述的从虎杖中提取白藜芦醇的HPLC检测方法，其特征在于：步骤2)中，分析时间为40min。

4.根据权利要求1所述的从虎杖中提取白藜芦醇的HPLC检测方法，其特征在于：步骤1)中，所述的前处理方法考察包括：提取溶剂分别采用无水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、稀乙醇；提取方法包含超声提取法、加热回流法、冷浸法；提取固料比(1:10～1:100)；提取溶剂体积分数分别为30％、50％、75％、95％、100％；提取时间分别为30min、60min、90min。

5.根据权利要求1所述的从虎杖中提取白藜芦醇的HPLC检测方法，其特征在于：步骤1)中，所述的前处理方法包括：取虎杖药材粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％乙醇20mL；密塞，加热回流30分钟，取出，放冷至室温后，用甲醇补回失去的重量。过滤，取续滤液，即得。

6.根据权利要求5所述的从虎杖中提取虎杖苷和白藜芦醇的HPLC检测方法，其特征在于：所述前处理方法，结合实际生产情况，对虎杖提取工艺进行优化包括：酶解温度；酶解时间；酶解液PH值。

7.根据权利要求6所述的从虎杖中提取虎杖苷和白藜芦醇的HPLC检测方法，其特征在于：所述虎杖纤维素酶酶解工艺优化最佳为：酶解液pH7.5、酶解温度55℃、酶解时间6小时。

8.根据权利要求1所述的从虎杖中提取虎杖苷和白藜芦醇的HPLC检测方法，其特征在于：对虎杖提取工艺优化结果成分进行测定。