[发明专利]一种从虎杖中提取虎杖苷和白藜芦醇的HPLC检测方法在审

专利信息
申请号: 201710500484.X 申请日: 2017-06-27
公开(公告)号: CN107300590A 公开(公告)日: 2017-10-27
发明(设计)人: 严萍;欧阳燕琴;潘杰;沈彩红;甘杰华;宋晓娟;钟李婷;詹若挺 申请(专利权)人: 广州中医药大学
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06
代理公司: 广州新诺专利商标事务所有限公司44100 代理人: 卢颂昇,张玲春
地址: 510006 广东省广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 虎杖 提取 藜芦 hplc 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种从虎杖中提取虎杖苷和白藜芦醇的HPLC检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)供试品溶液的制备

称取虎杖粉末,精密称定,置于干燥具塞锥形瓶中;精密移取甲醇,称定重量,超声处理30min;取出,放冷至室温后,用甲醇补回失去的重量;过滤,取续滤液,即得供试品;

2)高效液相色谱分析

色谱柱:Phenomenex5μm EVO C18(250mm×4.6mm,5μm);

柱温:25℃;

检测波长:306nm;

流动相:乙腈-水(23:77),等度洗脱;

流速:1mL/min;

进样量:10μL。

2.根据权利要求1所述的从虎杖中提取白藜芦醇的HPLC检测方法,其特征在于:步骤2)中,所述高效液相色谱分析的条件包括:采用反相填料色谱柱;检测波长为306nm以及全波长扫描,流速为0.8~1.2ml/min,进样量为2~20μl,柱温为20~35℃,流动相为乙腈-水及其他,等度洗脱。

3.根据权利要求1所述的从虎杖中提取白藜芦醇的HPLC检测方法,其特征在于:步骤2)中,分析时间为40min。

4.根据权利要求1所述的从虎杖中提取白藜芦醇的HPLC检测方法,其特征在于:步骤1)中,所述的前处理方法考察包括:提取溶剂分别采用无水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、稀乙醇;提取方法包含超声提取法、加热回流法、冷浸法;提取固料比(1:10~1:100);提取溶剂体积分数分别为30%、50%、75%、95%、100%;提取时间分别为30min、60min、90min。

5.根据权利要求1所述的从虎杖中提取白藜芦醇的HPLC检测方法,其特征在于:步骤1)中,所述的前处理方法包括:取虎杖药材粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%乙醇20mL;密塞,加热回流30分钟,取出,放冷至室温后,用甲醇补回失去的重量。过滤,取续滤液,即得。

6.根据权利要求5所述的从虎杖中提取虎杖苷和白藜芦醇的HPLC检测方法,其特征在于:所述前处理方法,结合实际生产情况,对虎杖提取工艺进行优化包括:酶解温度;酶解时间;酶解液PH值。

7.根据权利要求6所述的从虎杖中提取虎杖苷和白藜芦醇的HPLC检测方法,其特征在于:所述虎杖纤维素酶酶解工艺优化最佳为:酶解液pH7.5、酶解温度55℃、酶解时间6小时。

8.根据权利要求1所述的从虎杖中提取虎杖苷和白藜芦醇的HPLC检测方法,其特征在于:对虎杖提取工艺优化结果成分进行测定。

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