[发明专利]一种钻喙兰花粉的超低温保存方法有效
| 申请号： | 201710501079.X | 申请日： | 2017-06-27 |
| 公开（公告）号： | CN107372471B | 公开（公告）日： | 2020-10-16 |
| 发明（设计）人： | 谢佩吾;马锞;李汉文;李早文;伍爱萍;江南 | 申请（专利权）人： | 东莞市农业科学研究中心 |
| 主分类号： | A01N3/00 | 分类号： | A01N3/00 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 单香杰 |
| 地址： | 523086 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 钻喙兰 花粉 超低温 保存 方法 | ||
1.一种钻喙兰花粉的超低温保存方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1.采粉和干燥：摘取新鲜花粉块，放入透气袋中密封，并将透气袋置于放有干燥剂的培养皿中，在0～4℃条件下放置1～3h；
S2.冻存：将花粉块取出，放入冻存管中，加入预处理液，室温下静置10～45 min；然后将冻存管中的预处理液吸出，加入玻璃化溶液MPVS2，将冻存管投入液氮保存；所述玻璃化溶液MPVS2的成分为：30% (w/v)甘油、15% (w/v)乙二醇、7.5～10% (w/v)丙二醇、5～7.5%(w/v)DMSO，用含有0.4M蔗糖的BK无机盐储备液配制，pH为5.7；
S3.解冻：将冻存管取出，解冻后将冻存管中原有的溶液吸出一半，并加入相应体积的冲洗液，静置5～10 min，如此重复2～4次。
2.根据权利要求1所述钻喙兰花粉的超低温保存方法，其特征在于，步骤S2所述玻璃化溶液MPVS2的成分为：30% (w/v)甘油、15% (w/v)乙二醇、10% (w/v)丙二醇、5% (w/v)DMSO，用含有0.4M蔗糖的BK无机盐储备液配制，pH为5.7。
3.根据权利要求1所述钻喙兰花粉的超低温保存方法，其特征在于，步骤S1所述透气袋为茶叶袋。
4.根据权利要求1所述钻喙兰花粉的超低温保存方法，其特征在于，步骤S1所述干燥剂为变色硅胶。
5.根据权利要求1所述钻喙兰花粉的超低温保存方法，其特征在于，步骤S2所述预处理液成分为含有0.4M蔗糖、2M甘油的BK无机盐储备液。
6.根据权利要求1所述钻喙兰花粉的超低温保存方法，其特征在于，步骤S3所述冲洗液为含有1.2M蔗糖的BK无机盐储备液。
7.根据权利要求1所述钻喙兰花粉的超低温保存方法，其特征在于，步骤S3所述解冻操作为将冻存管置于室温下或用自来水冲洗30min。
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