[发明专利]一种快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法

权利要求书

1.一种快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)标准溶液配制：

准确称取苯唑青霉素钠、氨苄青霉素、氯唑西林钠、双钠青霉素钠盐水合物、头孢噻呋、萘夫西林钠一水合物、苯唑西林钠、苯氧甲基青霉素钾盐、哌拉西林标准品5.0mg，于各自的5mL容量瓶中，用体积比为乙腈:水＝30:70的乙腈水溶液溶解并定容至刻度，制成质量浓度为1mg/mL的标准储备液，准确称取2-氨基-5-苯并咪唑、妥曲珠利、克拉珠利、酮洛芬、美洛昔康、对乙酰氨基酚、吡罗昔康、水杨酸、舒林酸、托灭酸、托美丁钠、4-氨基安替比林、4-甲酰氨基安替比林、4-甲氨基安替比林、保泰松、17α-羟孕孕酮、醋酸美伦孕酮、乙酸甲地孕酮、甲羟孕酮、群地龙、勃地酮和诺龙标准品各5.0mg，于各自的5mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，制成质量浓度为1mg/mL的标准储备液，置于4℃冰箱中保存；

(2)样品的QuEChERS提取和净化：

称取粉碎均匀的鱼肉样品2.0g于50mL高速离心管中，加入1.5g氯化钠、5g Na₂SO₄和10mL乙腈，涡旋震荡2min后超声提取10min，再以15000r/min，温度5℃离心10min，将上层液转移至已提前放入0.05g C18、0.08g正丙基乙二胺(PSA)、4g Na₂SO₄和0.025g氨丙基硅胶的25mL离心管中，涡旋震荡5min，再以15000r/min，温度5℃离心3min，上清液转入30mL玻璃管中，得样品提取液；

(3)浓缩：将样品提取液在40℃下用平行定量浓缩仪减压浓缩至干，用1.0ml体积比为乙腈:水＝10:90的乙腈水溶液涡旋溶解残留物，提取液过0.2μm滤膜后，用超高效液相色谱-高分辨质谱仪测定；

所述超高效液相色谱-高分辨质谱仪的参数为：

色谱：ACQUITY UPLC BEH C18 100mm×2.1mm，1.7μm；柱温：40℃；进样量：10μL；流动相：A为0.1％甲酸水溶液，B为0.1％甲酸乙腈溶液；梯度洗脱程序0～1.0min，保持95％A；1.0～7.0min，流动相A的比例由95％线性变化至5％；7.0～10.0min，保持5％A；10.1～13min，保持95％A；

质谱：加热电喷雾离子源温度为350℃，离子传输温度为320℃，鞘气为40unit，辅助气为40unit，毛细管电压为3.2KV，离子传输管温度为325℃；Full scan/ddms2扫描模式：采集范围为100～1500Da，正负切换采集；一级质谱分辨率为70000FWHM，二级质谱分辨率为17500FWHM；碰撞池能量NCE为20，40，60eV。

2.根据权利要求1所述的一种快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法，其特征在于所述样品提取液用平行定量浓缩仪减压浓缩，平行定量浓缩仪的冷凝温度为0℃，真空度采用300mbar 10min，100mbar 10min，30mbar梯度下降的方式浓缩至干。

3.根据权利要求1所述的一种快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法，其特征在于质谱仪进行一级全扫描时发现目标列表里的母离子时，且信号强度超过预设值后，就会触发数据依赖子离子扫描模式，进而获得对应母离子精确质量数的二级离子全扫描质谱信息，计算离子碎片的精确质量数，通过与质谱图谱拟合确定每种待测物质有1个监测离子对用于定性确证。