[发明专利]一种快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法

说明书

本发明公开了一种快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法，首先配制31种标准溶液，进行测定，并绘制标准工作曲线，采用QuEChERS的方法对样品进行前处理，有效地减少了基质对目标化合物(包括β－内酰胺类、非甾体类抗炎药等31种兽药残留)的干扰影响，再将处理后的样品用超高效液相色谱‑高分辨质谱仪测定。本发明可以测定鱼肉中31种兽药残留，灵敏度高，检测限为0.1μg/kg～2.5μg/kg，检测方法简单、快速、准确、灵敏度高、精密度好，适用于大批量检测鱼肉样品，能够准确的对目标化合物进行定量、定性分析，避免了假阳性的现象出现。

【技术领域】

本发明涉及一种快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法，属于食品化学分析技术领域。

【背景技术】

随着现代养殖业日趋集约化、规模化地快速发展，为了追求更大的商业利益和减少高密度饲养带来的风险，常常出现水产品养殖户滥用兽药的情况。造成兽药残留的另外一个原因就是不遵守休药期及水产品卫生规定，引起水产品中兽药残留，而这些受污染的水产品经食物链进入人体后，容易导致产生蓄积毒性、细菌耐药性等一系列连锁危害，严重威胁着人们的身体健康。水产品中兽药的使用与残留越来越受到广泛的关注，许多国家和国际组织均制定了水产品中药物残留的限制标准。日本从2006年5月29日实施的《食品中残留农药的肯定列表制度》中对涉及水产品的134种化学药物残留量限定。美国FDA对水产品进口要检查221种化学药物的残留，严禁使用的药品有10种。欧盟、加拿大、韩国等国家近几年也相应地提高了水产品药物残留的限制。

鱼肉中兽药残留检测方法主要有酶联免疫法、高效液相色谱法、气相色谱-串联质谱法(GC-MS)、液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)和液相色谱-高分辨质谱法。其中酶联免疫法易出现假阳性结果和交叉反应；高效液相色谱法的抗干扰能力差，灵敏度低且不能满足标准限值的要求；GC-MS方法需对样品进行繁琐的衍生化处理；LC-MS/MS技术无需衍生化处理，而且在满足多组分同时检测的情况下仍有较好的选择性、灵敏度和特异性，弥补了前几种方法的缺陷，但是其难以完全阐明化合物的结构裂解信息，定性准确度方面尚有欠缺，容易产生假阳性的结果。水产品中兽药残留的检测的前处理方法包括固相萃取、基质固相分散萃取、快速溶剂萃取、微波辅助萃取、分子印迹技术和QuEChERS等。QuEChERS由于具有快速、简单、便宜、有效、耐用和安全可靠等优势在检测水产品中兽药残留应用日趋增多，但是其易产生基质效应，会对方法的检测限、选择性，以及测试结果的准确定量产生影响。

四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪(Q-Exactive)具有分辨率高及定量能力好的优点，不同于三重四极杆低分辨质谱使用多反应监测模式通过目标物的离子对进行定量分析，高分辨质谱可以利用目标物母离子的精确分子量直接定量，无需对目标物逐个优化子离子及相关参数，对于多目标物分析可以极大地降低检测方法的时间，同时又能很好地避免低分辨质谱易受基质干扰而产生假阳性的现象。

但是由于鱼肉基质复杂，含有脂肪、蛋白质等多种组分，常规的处理方法，目标化合物在Q-Exactive中由于基质的干扰，检测低限无法满足现有国家相关卫生标准和公告的要求。

【发明内容】

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种使用QuEChERS-UPLC-Q ExactiveOrbitrap MS快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法，本发明方法可以同时检测出31种兽药残留，并且简单、快速、准确、灵敏度高、精密度好，适用于大批量检测鱼肉样品，填补了现有检测技术的空白。

本发明为实现上述目的，采用以下技术方案：

一种快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)标准溶液配制：