[发明专利]基于微卫星标记Scabrou_B的魁蚶基因型检测引物和方法

权利要求书

1.一种魁蚶微卫星标记Scabrou_B的基因型检测方法，其特征在于，首先提取魁蚶肌肉中的基因组DNA并稀释备用；再利用魁蚶DNA序列中含有的微卫星核心序列，使用特异性引物对魁蚶不同个体的基因组DNA进行PCR扩增，对PCR产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，从而确定魁蚶不同个体在Scabrou_B核心序列区的基因型。

2.一组魁蚶微卫星标记Scabrou_B的检测引物，其特征在于，所述引物序列为：

正链5’- ATATCACGAATACTGATAATTTG -3’，

负链5’- GAAACTTCACCCATACACAAATT -3’，使用该引物时的退火温度为53℃。

3.如权利要求1所述的魁蚶微卫星标记Scabrou_B的检测方法，其特征在于，对不同魁蚶个体的基因组DNA进行的PCR扩增，其加样参数为：每个PCR反应总体积为25μl，包括100ng魁蚶基因组DNA；10×PCR Buffer，2.5μl；Mg²⁺ 1.5 mmol/L；Taq酶1u；dNTP 0.1mmol/L；权利要求2中所述的特异性引物各10 pmol；最后加ddH₂O至25μl；设置PCR仪的程序参数为：94℃变性2min；94℃ 30sec，53℃ 45sec，72℃ 40sec，该反应进行35个循环；72℃延伸5 min，4℃保存。

4.如权利要求1所述的魁蚶微卫星标记Scabrou_B的检测方法，其特征在于，对PCR产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测的步骤：将PCR产物在8％的变性聚丙烯酰胺凝胶中以15W恒功率电泳1.5小时进行分离, 以10％的冰醋酸溶液浸泡30min，然后蒸馏水冲洗5min，再以0.1％的硝酸银溶液浸泡30min，用3％的碳酸钠溶液显色 5min，最后用10％的冰醋酸溶液浸泡5min。

5.权利要求1-4所述的方法在魁蚶群体间遗传多态性图谱构建上的应用。