[发明专利]一种甲氨蝶呤与阿伦磷酸钠偶联物的制备方法

说明书

一种甲氨蝶呤与阿伦磷酸钠偶联物的制备方法，本发明属于有机制药生产技术领域。将甲氨蝶呤、超纯水、有机溶剂混合，取得甲氨蝶呤溶液；再将吗啉乙磺酸、N‑羟基丁二酰亚胺、1‑（3‑二甲氨基）‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐加入上述甲氨蝶呤溶液中，得甲氨蝶呤混合溶液；在磁力搅拌下，将甲氨蝶呤混合溶液与阿仑膦酸钠混合进行反应，经透析后，冷冻干燥，得到纳米级甲氨蝶呤与阿伦磷酸钠偶联物。这种偶联物可以获得一种新型骨科靶向药物，使得药物能够向骨科病炤部位富集，从而达到更好的治疗效果。

技术领域

本发明属于有机制药生产技术领域。

背景技术

甲氨蝶呤（4-氨基-10-甲基叶酸，简称：MTX）是叶酸类似物，甲氨蝶呤于1988年开始用于治疗类风湿关节炎（RA）。而甲氨蝶呤与阿达木单抗等生物制剂联合用药，可以更有效地缓解RA患者的疾病症状，减缓关节损伤的进展（X线显示），并且可以改善身体功能。与传统药物相比，阿达木单抗等生物制剂的疗效强且持久，且耐受性良好。

阿仑膦酸钠（简称：ALN）1995年在美国以Fosamax的名称上市，用于治疗骨质疏松症和变形性骨炎，1997年5月FDA再次批准其预防骨质疏松和预防骨折的扩大适应症，成为第一个被FDA批准用于预防骨质疏松症的非激素类药物，阿仑膦酸钠对骨的增重作用类似于雌激素，优于降钙素，能显著增加骨密度，降低骨折发生率，口服有效，作用持久，具有良好的耐受性和较高的安全性。

中国专利文献CN 104371009 A提供了一种GnRH 多肽-甲氨蝶呤偶联物的制备方法，在 GnRH 多肽或其类似物含有 D-Lys 单元中的氨基的情况下，通过使甲氨蝶呤 活性酯与 GnRH 多肽或其类似物的 D-Lys 上的氨基发生酰胺化反应制备。该发明提供一种含有甲氨蝶呤的药物组合物，增加药物的靶向性，但是，这些现有技术存在原料成本高，工艺制作复杂，操作要求繁琐等问题，因而无法大规模生产。

发明内容

本发明旨在提供一种方便工业化应用的甲氨蝶呤与阿伦磷酸钠偶联物的制备方法。

本发明包括以下步骤：

1）将甲氨蝶呤、超纯水、有机溶剂混合，取得甲氨蝶呤溶液；

2） 将吗啉乙磺酸（MES）、N-羟基丁二酰亚胺（NHS）、1-（3-二甲氨基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）加入上述甲氨蝶呤溶液中，得甲氨蝶呤混合溶液；

3）在磁力搅拌下，将甲氨蝶呤混合溶液与阿仑膦酸钠混合进行反应；

4）反应结束后，将所得溶液经300～600的分子量透析袋透析后，取透析袋中物质冷冻干燥，得到纳米级甲氨蝶呤与阿伦磷酸钠偶联物。

本发明以甲氨蝶呤提供羧基的原料，吗啉乙磺酸（MES）用于将反应液形成生物缓冲液，防止反应期间pH变化太大，NHS和EDC联用作为反应的交联剂，可活化羧基，活化之后加入原料阿仑膦酸钠，提供氨基与甲氨蝶呤的羧基耦合，生成目标产物。然后透析掉原料，冷冻干燥以得到成品。

本发明采用以上方法制得的甲氨蝶呤与阿伦磷酸钠偶联物为纳米级，这种偶联物可以获得一种新型骨科靶向药物，使得药物能够向骨科病炤部位富集，从而达到更好的治疗效果。

进一步地，本发明甲氨蝶呤与阿仑膦酸钠的投料摩尔比为1∶1～1.2。该用料比可节约原料，并且控制甲氨蝶呤与阿仑膦酸钠按1∶1的比例耦合。

所述有机溶剂为丙酮或氯仿。可提高原料甲氨蝶呤的溶解度，从而提高原料的利用率。

所述吗啉乙磺酸（MES）、N-羟基丁二酰亚胺（NHS）和1-（3-二甲氨基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）的投料摩尔比为1∶0.2～5∶0.2～5。该用料比可提高催化剂的浓度以增加催化活性，从而提高产率。