[发明专利]一种低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法

权利要求书

1.一种低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法：其特征在于，包括以下步骤：

S1：人参总皂苷的制备：以人参属植物的植株组织为原料，用低级醇提取多糖基原人参总皂苷，提取次数控制在1-3次，然后将提取液合并，然后将提取液进行减压压缩，得到不含有低级醇的浓缩液，浓缩液经环己烷或有机醚脱脂后，即得多糖基原人参总皂苷的提取液，对多糖基原人参总皂苷的提取液进行干燥得到易于保存的人参总皂苷干粉；

S2：人参皂苷水解酶的制备：在S1中提取多糖基原人参总皂苷后的滤渣中加入提取自有酶的缓冲液，进行提取，提取次数控制在1-2次，得到含有水解酶且不含皂苷的水溶性成分，然后将水溶性成分减压浓缩，得到浓缩物，浓缩物即为含有人参水解酶的提取物；提取自有酶的缓冲液为柠檬酸–柠檬酸钠、磷酸盐缓冲液或乙酸-乙酸钠缓冲液中的一种，pH为4～8，浓度为0.005～0.2mol/L，提取自有酶的缓冲液的添加量为滤渣的4～12倍体积，提取温度控制在65～95℃，压缩时温度在45～70℃，压强控制在-0.01Mpa～-1Mpa，减压浓缩后得到浓缩物为固形物为40Brix以上的浓缩液；

S3：制备人参次苷群及其苷元的混合物：将多糖基原人参总皂苷提取液或将人参总皂苷干粉配制成溶液和含有人参水解酶的提取物混合均匀，得到混合液，然后对混合液进行加热，混合液在加热条件下进行反应，在反应过程中添加有机酸调节溶液酸度，反应结束后，分离纯化酶解产物，即得低糖基人参次苷群及其苷元的混合物。

2.根据权利要求1所述的一种低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法，其特征在于，S1中人参属植物为三七参、西洋参、人参、珠子参和竹节参中的一种或者几种，S1中人参属植物的植株组织为根、茎、叶、种子、花和果实中的一种或者几种，S1中低级醇为甲醇或乙醇中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的一种低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法，其特征在于，S1中低级醇的添加量为人参属植物组织的4～12倍体积。

4.根据权利要求1所述的一种低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法，其特征在于，S1中用低级醇提取多糖基原人参总皂苷过程中控制温度为室温或50～95℃，S1中用低级醇提取多糖基原人参总皂苷过程中每次提取时间为2～48小时。

5.根据权利要求1所述的一种低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法，其特征在于，S1中减压浓缩时温度控制在30～75℃，压强控制在-0.01Mpa～-1Mpa。

6.根据权利要求1所述的一种低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法，其特征在于，S3中多糖基原人参总皂苷提取液或将人参总皂苷干粉配制成的溶液和含有人参水解酶的提取物混合过程中控制多糖基原人参总皂苷提取液或人参总皂苷溶液和含有人参水解酶的提取物的质量比为1：0.01～100，S3中多糖基原人参总皂苷提取液的底物浓度为0.01～50％，S3中加热条件下进行反应时温度控制在70～95℃，S3中加热条件下进行反应的时间控制在1～24小时，S3中有机酸为甲酸、醋酸、柠檬酸、乳酸或苹果酸中的一种，S3中有机酸的添加量占反应体系总体积的0.5～50％。

7.根据权利要求1所述的一种低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法，其特征在于，S3中生成的低糖基人参次苷群及其苷元的混合物包括不含糖基的二醇和三醇皂苷元(aglycone)；单糖基的人参皂苷20(S)-Rh1、20(R)-Rh1、20(S)-Rh2、20(R)-Rh2、Rh3、Rh4、Rk2、Rk3；二糖基的人参皂苷Rg1、20(S)-Rg2、20(R)-Rg2、20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rg4、Rg6、Rk1、Rk5，和微量其他苷类和非苷类杂质的混合物，产物中同时含有二醇类和三醇类稀有人参次苷。

8.如权利要求1-7任一所述方法制备的低糖基人参次苷群及其苷元的混合物的应用，其特征在于，生成的低糖基人参次苷群及其苷元的混合物利用萃取法、结晶法、大孔吸附树脂法、制备型液相色谱法或硅胶柱层析法，对低糖基人参次苷群及其苷元的混合物进行分离纯化，制备某几种皂苷的混合物或单体皂苷及苷元，制备的某几种皂苷的混合物或单体皂苷及苷元，直接制成成品或者作为食品、药品和化妆品的原料。