[发明专利]一种家蚕浆细胞特异性分子标记鉴定方法

权利要求书

1.一种家蚕浆细胞特异性分子标记鉴定方法，其特征在于，所述家蚕浆细胞特异性分子标记鉴定方法包括：

步骤一，通过对家蚕细胞的转录组生物信息学数据分析，共筛选获得浆细胞特异性性表达的候选基因；

步骤二，通过实时荧光定量PCR对基因在mRNA水平上验证，筛选出家蚕基因Integrinβ2和Integrinβ3在浆细胞里特异性地高表达；

步骤三，采用家蚕基因Integrinβ2和Integrinβ3特有的引物序列，经过PCR技术对这两个基因的序列进行克隆扩增，并将所得的扩增产物进行测序验证；

步骤四，采用家蚕基因Integrinβ2和Integrinβ3特有的RACE引物序列，利用RACE扩增技术获得其cDNA全长序列；

步骤五，根据cDNA全长序列，进行家蚕基因Integrinβ2和Integrinβ3的原核表达及蛋白纯化，并制备获得抗体；

步骤六，利用所获得Integrinβ2和Integrinβ3的抗体在家蚕细胞水平，以及转基因家蚕个体水平等验证，确定Integrinβ2和Integrinβ3能特异性地标记家蚕循环血细胞中的浆细胞。

2.如权利要求1所述的家蚕浆细胞特异性分子标记鉴定方法，其特征在于，所述步骤一中共筛选获得141个浆细胞特异性性表达的候选基因。

3.如权利要求1所述的家蚕浆细胞特异性分子标记鉴定方法，其特征在于，所述步骤三中Integrinβ2和Integrinβ3特有的引物序列为：SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。

4.如权利要求1所述的家蚕浆细胞特异性分子标记鉴定方法，其特征在于，所述步骤四中Integrinβ2和Integrinβ3特有的RACE引物序列为：SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4。