[发明专利]蒙古韭组培抑菌剂、蒙古韭组织培养基和蒙古韭组培方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种蒙古韭组培抑菌剂、蒙古韭组织培养基和蒙古韭组培方法。

背景技术

蒙古韭(Allium mongolicum Regel)属百合科葱属根茎组，别名为沙葱，为多年生草本旱生植物，分布于陕西、甘肃、宁夏、内蒙古、新疆和青海等6省(区)。蒙古韭富含人和动物所必需的微量元素、维生素和氨基酸等各种营养成分，不仅嫩叶、嫩花等器官营养丰富，风味独特，凉拌、炒食或腌制皆可食用，也是一种优等的饲用植物，适宜牛、羊、马和骆驼食用且均能增膘。此外，蒙古韭可入药，能开胃、消食和杀虫，主治消化不良、不思饮食、秃疮和青腿病等多种疾病，具有除瘴气排恶毒等重要的药理作用，被誉为“大漠野菜”、“沙原佳蔬”、“菜中灵芝”。因此，蒙古韭是一种营养价值和药用价值极高的野生绿色蔬菜，具有进一步开发利用的价值，产业生产的市场前景十分广阔。

植物组织培养技术作为现代生物技术的重要领域之一，在农业生产领域和工厂化育苗方面应用广泛，对于植物优良种质资源保存、优良品种的快速繁殖等方面也发挥着重要的作用。在植物组织培养过程的各技术环节中，控制污染是影响植物生长的关键技术。影响污染的因素多种多样，如消毒时间以及消毒方法、培养基和器皿灭菌、操作人员、工作环境的要求和超净工作台的工作质量等都与污染密切相关，因此，使得污染问题十分复杂，也很难防治，成为限制组培产业化的重要原因之一。植物组培过程中的污染，又主要表现为培养基的污染，培养基中丰富的营养物质能够为细菌、真菌提供适宜的滋生环境。

现有植物组织培养的培养基灭菌方法主要采用高压蒸汽灭菌方法，这种方法有灭菌彻底和不易污染的优点。但是，高压蒸汽灭菌存在以下缺点：设备较贵、消耗能源多，以及灭菌时间长；在高温蒸汽灭菌过程中，培养基内会发生一些化学反应，培养基的成分会伴随着发生一些变化，如在121℃、20min条件下，59％的赖氨酸和精氨酸及其他碱性氨基酸被破坏，蛋氨酸和色氨酸也有相当数量被破坏；培养基的灭菌数量有限，生产成本较高等。目前，植物组培污染防治方面致力于研究能够有效抑菌且不影响培养基活性、操作简便的抑菌方法，在培养基中添加抗菌剂是降低细菌污染的有效途径，能够大大减少操作过程中，特别是内生菌带来的污染。常用抗生素、抗菌素、防腐剂在植物组培污染的防治方面有一定的作用，但现有的抗菌剂在抑制植物组培污染的同时，容易产生抑制组培植物生长、引发环境污染、引起组培微生物耐药性以及危害人畜安全等方面的问题。例如植物中抗生素的使用易产生抗药性，一旦停止使用，污染率又显著上升；另外，抗生素的长效使用容易对植物的生理生化特性产生影响，造成植物中抗生素的残留，影响植物的食用和药用价值。另一方面，抗菌剂针对不同植物的组培灭菌效果上存在很大差异。

中国专利文献CN106035080A公开了一种沙葱再生苗和沙葱愈伤组织的获取方法，通过组织培养技术对蒙古韭进行繁殖，提高了对蒙古韭的发掘和应用力度。但上述文献中公开的组织培养技术仍为传统的植物组织培养，培养基以及培养器皿需要高压灭菌，并且整个操作过程需要在无菌环境下完成，导致整个植物组织培养过程灭菌成本高、操作繁琐，不利于实现蒙古韭的工业化育苗。

发明内容

因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中蒙古韭组织培养过程中对无菌环境要求苛刻，灭菌成本高、植物组织培养过程操作繁琐，无法实现蒙古韭的工业化育苗；从而提供一种能够高效抑菌、安全环保，同时对蒙古韭生长有促进作用的蒙古韭组培抑菌剂。

本发明提供了一种蒙古韭组培抑菌剂，所述蒙古韭组培抑菌剂由包括以下重量份的原料提取而成：砂韭44-50重量份、寻骨风8-14重量份和乌蕨8-20重量份。

所述的蒙古韭组培抑菌剂，所述原料包括：砂韭48重量份、寻骨风10重量份和乌蕨14重量份。

本发明提供了一种上述的蒙古韭组培抑菌剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)按照选定重量份数分别称取砂韭、寻骨风和乌蕨，在45℃温度下烘干，然后将烘干后的植物粉碎，得到植物干粉；

(2)向步骤(1)得到的粉末中加入蒸馏水,在58℃水浴回流提取三次，每次三小时，然后将三次提取得到的提取液合并；

(3)将步骤(2)中合并后的提取液进行真空抽滤，抽滤后的滤液进行浓缩，得到水提浓缩液，即得所述的蒙古韭组培抑菌剂。

本发明提供了一种蒙古韭组织培养基，所述蒙古韭组织培养基中添加所述的蒙古韭组培抑菌剂。

所述的蒙古韭组织培养基，所述蒙古韭组织培养基为诱导培养基、增殖培养基或生根培养基。