[发明专利]一种奥贝胆酸有关物质的检测方法

权利要求书

1.一种奥贝胆酸有关物质的检测方法，其特征在于，其包括下述步骤：采用高效液相色谱法，将待测物在C18柱中进行梯度洗脱，即可；

所述的待测物含有奥贝胆酸有关物质以及奥贝胆酸和/或奥贝胆酸盐；所述的梯度洗脱所使用的流动相为流动相A、流动相B和流动相C；所述的流动相A为酸的水溶液；所述的流动相B为乙腈；所述的流动相C为甲醇；

所述的梯度洗脱为三段式梯度洗脱或四段式梯度洗脱；

当所述的梯度洗脱为三段式梯度洗脱时，其第一梯度中，流动相A的体积比例为25％～40％、流动相B的体积比例为50％、流动相C的体积比例为10％～25％；其第二梯度中，流动相A的体积比例为0％～5％、流动相B的体积比例为95％～100％、流动相C的体积比例为0％；其第三梯度中，流动相A的体积比例为25％～40％、流动相B的体积比例为45％～50％、流动相C的体积比例为15％～25％；其第一梯度的时间段为0min～37min；其第二梯度的时间段为38min～64min；其第三梯度的时间段为65min～70min；

当所述的梯度洗脱为四段式梯度洗脱时，所述的梯度洗脱为如下任一条件：

条件1：

条件2：

条件3：

所述的流动相A中的酸为挥发性酸；

所述的奥贝胆酸有关物质为下述结构中的一种或多种：

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的奥贝胆酸盐中的“盐”为药学上可接受的有机或无机盐；

和/或，所述的待测物还含有无机杂质；

和/或，所述的待测物还含有残留溶剂；

和/或，所述的待测物还含有药用辅料；

和/或，所述的C18柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶；

和/或，所述的C18柱的柱长为100mm～300mm；

和/或，所述的C18柱的内径为1mm～10mm；

和/或，所述的C18柱的粒径为1μm～10μm；

和/或，所述的C18柱的柱温为25～40℃；

和/或，所述的流动相A的pH为2.0～4.0；

和/或，当所述的梯度洗脱为三段式梯度洗脱时，其第一梯度中，流动相A的体积比例为32％；

和/或，当所述的梯度洗脱为三段式梯度洗脱时，其第一梯度中，流动相C的体积比例为18％；

和/或，当所述的梯度洗脱为三段式梯度洗脱时，其第三梯度中，流动相A的体积比例为32％；

和/或，当所述的梯度洗脱为三段式梯度洗脱时，其第三梯度中，流动相C的体积比例为18％；

和/或，所述的梯度洗脱的进样量为10～100μl；

和/或，所述的梯度洗脱的运行时间为40-80min；

和/或，所述的梯度洗脱的流速为0.8-1.3ml/min；

和/或，所述的检测方法还包括下述步骤：在梯度洗脱后，采用蒸发光散射检测器检测洗脱液。

3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述的奥贝胆酸盐中的“盐”为钙盐、钠盐、钾盐、镁盐、盐酸盐、磷酸盐、硝酸盐、甲酸盐、醋酸盐、乙二酸盐、丙酸盐、酒石酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、碳酸盐、碳酸氢盐、苯甲酸盐、枸橼酸盐和甲磺酸盐中的一种或多种；

和/或，所述的C18柱的柱长为250mm；

和/或，所述的C18柱的内径为4.6mm；

和/或，所述的C18柱的粒径为5μm；

和/或，所述的C18柱的柱温为30℃；

和/或，所述的挥发性酸为三氟乙酸、甲酸和乙酸中的一种或多种；

和/或，所述的流动相A的pH为2.2；

和/或，所述的梯度洗脱的流速为1.2ml/min；

和/或，所述的蒸发光散射检测器为ALLTECH-6000；

和/或，所述的蒸发光散射检测器的漂移管的温度为90～100℃；

和/或，所述的蒸发光散射检测器的气体流速为2.0-2.8L/min。