[发明专利]高效液相色谱法分离测定比拉斯汀中间体化学纯度的方法

说明书

本发明属分析化学领域，本发明公开了一种用液相色谱法分离检测比拉斯汀中间体4‑[1‑(4,5‑二氢‑4,4‑二甲基‑2‑恶唑基)‑1‑甲基乙基]苯乙醇及其有关物质的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以缓冲盐溶液‑有机相为流动相梯度洗脱，可以定量测定比拉斯汀中间体及其有关物质的含量，从而有效控制比拉斯汀中间体的化学纯度，减少副反应的发生和杂质的生成，实现比拉斯汀的质量可控。本发明方法灵敏度高，专属性强，准确度高，且操作简便。

技术领域

本发明公开了一种液相色谱分析方法，具体涉及一种分离比拉斯汀中间体及其有关物质的分析方法。

背景技术

比拉斯汀是新型长效组胺拮抗剂，能选择性拮抗周围H1受体而对毒蕈碱受体无明显的亲和性，临床上用于治疗变应性鼻炎和荨麻疹。比拉斯汀起效快且可持续作用24h、避免中枢神经系统和心血管的不良反应及具有良好的药代动力学性质（即吸收快、生物利用度高、体内半衰期长、不被肝脏代谢和主要随粪便排泄）。比拉斯汀中间体的化学名为4-[1-(4,5-二氢-4,4-二甲基-2-恶唑基)-1-甲基乙基]苯乙醇，分子式C₁₆H₂₃NO₂。其化学结构式为：

在合成比拉斯汀的过程中，需要控制一些关键中间体的纯度，以减少副反应的发生和杂质的生成，从而提高产物收率和纯度。

合成该化合物涉及的有关物质有4个，分别为有关物质A、B、C、D、E，结构式分别为：

。

对比拉斯汀中间体的化学纯度进行控制，在终产品比拉斯汀的合成及其质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离测定比拉斯汀中间体及其有关物质的高效液相色谱分析方法，从而保证比拉斯汀中间体的化学纯度，减少副反应的发生和杂质的生成，以实现其终产品比拉斯汀的质量控制。

本方法所述的用高效液相色谱法分离检测比拉斯汀中间体的化学纯度的方法，是采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以缓冲盐溶液-有机相为流动相进行梯度洗脱。

上述所说的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，色谱柱选自Alltima、Apollo或Diamonsil等品牌。

上述所说的有机相选自以下化合物中的一种或几种：甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇、四氢呋喃等，优选乙腈或甲醇溶液。

上述所说的方法中，缓冲盐溶液选自磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、高氯酸盐，优选磷酸盐。缓冲盐溶液的浓度为0.01～0.1mol/L，缓冲盐溶液的pH为2.0~5.0。

上述所说的方法中，流动相的洗脱梯度为：

。

本发明所述的分离分析方法，可按照以下方法实现：

（1）取比拉斯汀中间体样品适量，加乙腈使溶解并定量稀释成每1ml中含0.4mg的溶液，作为样品溶液；

（2）设置流动相流速为0.5～1.5ml/min，检测波长为200～300 nm，柱温：20℃~40℃；

（3）取（1）的样品溶液10～50 μl注入液相色谱仪，完成比拉斯汀中间体及其有关物质的分离与测定。其中：

高效液相色谱仪型号无特别要求，本发明采用岛津高效液相色谱仪：LC-20AT泵；SPD-M20A检测器；SIL-20AC自动进样器；CTO-10ASVP柱温箱；DGU-20A₃脱气机；CBM-20A控制器

色谱柱：C18 ( Alltima，250 mm×4.6 mm，5 μm)