[发明专利]一种高通量水稻叶片DNA提取的方法有效
| 申请号： | 201710539435.7 | 申请日： | 2017-07-04 |
| 公开（公告）号： | CN107365764B | 公开（公告）日： | 2020-08-25 |
| 发明（设计）人： | 李宇飞;肖金华;郑秀婷;许娜;彭佩;李乐 | 申请（专利权）人： | 华智水稻生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;姚自奇 |
| 地址： | 410125 湖南省长沙市远大二路长沙高*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 通量 水稻 叶片 dna 提取 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种高通量水稻叶片DNA提取的方法，其特征在于，包括：
①取20mg水稻叶片至2mL 96孔板中，将96孔板置于65℃的烘箱中60min；
②取出96孔板，每孔加入2颗4mm钢珠，迅速盖上硅胶膜，置于genogrinder中，1200rpm研磨2分钟；
③撕开硅胶膜，每孔加DNA提取液500uL，盖上硅胶膜，在漩涡振荡器上充分混匀；
④将96孔板置于75℃烘箱中30min，在第20min将96孔板取出置于漩涡振荡器上充分混匀；
⑤取出96孔板，4000rpm、离心10min；
⑥抽取上清液20uL至新的2mL 96孔板；
⑦每孔加380-1180uL超纯水，混匀即得DNA；
所述DNA提取液配方如下：
试剂 用量
KCl 74.55g
1M Tris-HCl 100mL
0.5M EDTA 20mL
H2O 880mL 。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，加入上清液20、25、30、40、50或60倍体积的超纯水。
3.权利要求1或2所述方法在水稻KASP基因型分型上的应用。
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