[发明专利]用于基因组编辑的药物诱导型融合蛋白及其编码基因与应用在审
| 申请号： | 201710549795.5 | 申请日： | 2017-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN109206520A | 公开（公告）日： | 2019-01-15 |
| 发明（设计）人： | 王宇;赵晨;张月 | 申请（专利权）人： | 中国科学院动物研究所 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/85;C12N15/62;C12N9/22 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;王璐 |
| 地址： | 100190 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 药物诱导 基因组 融合蛋白 串联 编码基因 核酸酶 融合 分子生物学领域 功能结构域 动态调控 基因功能 技术基础 潜在的 位点 应用 优化 开发 | ||
1.用于基因组编辑的药物诱导型融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括TALE、核酸酶N和2-5个串联的ERT2。
2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白由TALE、核酸酶N和2-5个串联的ERT2融合而成。
3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，其特征在于，所述TALE连接在串联的ERT2的C端，所述核酸酶N连接在TALE的C端。
4.权利要求1～3任一项所述的融合蛋白在药物诱导型基因组编辑中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，利用分别靶向基因组编辑位点两侧正义链和反义链的融合蛋白，实现药物诱导型的基因组编辑。
6.权利要求1～3任一项所述融合蛋白的编码基因。
7.含有权利要求6所述编码基因的载体。
8.一种利用药物诱导进行基因组编辑的方法，其特征在于，将分别含有靶向基因组编辑位点两侧正义链和反义链的融合蛋白的编码基因的成对质粒转染至细胞或组织，表达融合蛋白，在特定需要时间，利用4-OHT和/或TAM和/或它们的衍生物处理，诱导融合蛋白进入细胞核，发挥基因组编辑作用。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，在转染至人胚肾细胞系时，成对质粒中每种质粒的转染量为100ng～400ng/2×105个细胞，优选200ng/2×105个细胞。
10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，在转染至人胚肾细胞系时,成对质粒中一种质粒的转染量为400ng～600ng/2×105个细胞时，另一种质粒的转染量需小于100ng/2×105个细胞。
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