[发明专利]一种贻贝寡糖的制备方法及其产品和应用

说明书

本发明提供了一种贻贝寡糖的制备方法，采用以下步骤：将贻贝多糖粉末溶于蒸馏水中，加入α‑淀粉酶对贻贝多糖主链进行酶解，酶解液中加入酵母菌细胞除去单糖、二糖和三糖，活性炭纯化除去未降解的多糖，得到聚合度为4‑8的贻贝寡糖。本发明提供的贻贝寡糖的制备方法具有收率高，工艺简单，条件温和，易于放大等特点。同时，本发明还提供了贻贝寡糖在制备调血脂药物或食品中的应用，贻贝寡糖有进一步研发成降血脂的药物和保健食品的前景。

技术领域

本发明涉及一种寡糖的制备方法，尤其涉及一种聚合度在4-8之间的贻贝寡糖的制备方法。

背景技术

贻贝(Mytilus sp.)属于双壳类的一种贝类，是海洋贝类养殖中的重要种类，又名海红，俗称“海中鸡蛋”，味道鲜味，营养丰富。由于贻贝产量大，收获后不易保存，历来多煮熟后加工成干品——淡菜。淡菜营养价值很高，并有一定的药用价值，在《本草纲目》、《本草拾遗》及《日华子本草》中均有记载。现代药理学研究表明，贻贝具有提高免疫力、抗肿瘤、清除氧自由基、抗动脉粥样硬化、降血脂、抑制血栓的形成、改善心肌供氧及保护实验性心肌缺血、改善微循环和降血压等功效。其体内的多糖成分在贻贝的药用功效中起重要作用，贻贝多糖具有提高免疫力、抗肿瘤、降血脂、预防心脑血管疾病等多种功效。

申请人在申请号为201710351379.4的发明专利申请中提供了贻贝多糖的结构：贻贝多糖是一种以(1→4)-α-D-Glc为主链，含有(1→2)-α-D-Glc分枝的α-吡喃型葡聚糖，且该多糖具有显著的降血脂功效。(1→4)-α-D-Glc主链与淀粉主链结构一致，贻贝多糖与淀粉的主要区别在于贻贝多糖含有(1→2)-α-D-Glc分枝，支链淀粉含有(1→6)-α-D-Glc分枝，直链淀粉没有分支。淀粉主链在体内可被α-淀粉酶水解，贻贝多糖的主链在体内也应该能被水解，从而生成以(1→2)-α-D-Glc分枝为核心的寡糖，该寡糖可能是贻贝多糖发挥降血脂功能的有效形式。然而，目前国内外尚没有任何有关贻贝寡糖的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种工艺简单、环保的贻贝寡糖的制备方法，能够实现快速、低耗、大量生产贻贝寡糖。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种贻贝寡糖的制备方法，采用以下步骤：

(1)贻贝多糖粉末溶于蒸馏水中，调pH得贻贝多糖溶液；

(2)向步骤(1)中加入水解酶进行酶解，再灭活水解酶得酶解液；

(3)将步骤(2)中酶解液过滤，收集滤液，得贻贝寡糖溶液I；

(4)向步骤(3)所述贻贝寡糖溶液I中加入酵母菌细胞培养，离心取上清，得贻贝寡糖溶液II；

(5)将步骤(4)制得的贻贝寡糖溶液II加入活性炭，室温搅拌，过滤去上清；加入乙醇，室温搅拌，过滤去上清；再次加入乙醇，室温搅拌，过滤，收集滤液；滤液干燥后，得到贻贝寡糖样品。

步骤(1)中，所述贻贝多糖的结构式为：多糖溶液浓度为10％w.t，pH为5.0-7.0。

步骤(2)中，所述酶为α-淀粉酶，优选为中温淀粉酶；加入量为0.1-10g/L；酶解温度为30-70℃；酶解时间为0.5-10h；灭活条件为100℃，15min。

步骤(3)中，所述滤膜孔径为0.22μm。

步骤(4)中，所述酵母菌为酿酒酵母，来自中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)，编号为1002；酵母菌细胞加入量为5-10％(w/v)；培养条件为30℃、150rpm条件下摇床培养24-36h；

所述酵母菌细胞通过如下方法制得：采用YPD培养基培养酵母细胞，28℃培养30-40h，10000rpm离心2-5min；