[发明专利]用于蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒、检测方法及应用

权利要求书

1.一种用于蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒用于实时荧光RPA检测蜡样芽孢杆菌，包括基于蜡样芽孢杆菌16sRNA基因序列的一对引物和一条探针，

其中，所述的一对引物和一条探针的序列如下所示：

上游引物：5'-ATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAG-3'

下游引物：5'-CAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCA-3'

探针：5'-CTAAGTGTTAGAGGGTTTCCGCCCTTTAGTGC-FAM-dT-THF-

AAG-BHQ1-dT-TAACGCATTAAGC-C3-3'。

2.如权利要求1所述的用于蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒还包括冻干酶制剂和醋酸镁溶液。

3.如权利要求1或2所述的用于蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒的反应体系组成如下：2μL的10μM的上游引物，2μL的10μM的下游引物，0.6μL的10μM的探针，12.5μL的体积浓度为20％的聚乙二醇，1μL的病毒DNA模板，29.4μL的ddH₂O。

4.如权利要求2所述的用于蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒，其特征在于：所述冻干酶制剂包括1mM的脱氧核糖核苷三磷酸，90ng/μL的单链结合蛋白，120ng/μL的recA重组酶，30ng/μL的Bsu DNA聚合酶，30ng/μL的Exo核酸外切酶，100mmol/L的三羟甲基甘氨酸，体积浓度为20％的聚乙二醇，5mM的二硫苏糖醇，100ng/μL的肌酸激酶。