[发明专利]一种疫苗组合物及其制备方法

说明书

本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种疫苗组合物及其制备方法。本发明疫苗组合物含有包括禽流感病毒H9亚型抗原、禽腺病毒4型抗原、禽呼肠孤2型病毒抗原和禽白血病J型抗原以及佐剂；本发明疫苗组合物对禽流感病毒H9亚型、禽腺病毒4型、禽呼肠孤2型和禽白血病J型病毒均具有良好的免疫效果。

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种疫苗组合物及其制备方法。

背景技术

H9N2亚型禽流感属于低致病性禽流感，发病率高，但死亡率低。主要临床表现仅为轻度呼吸道症状，采食量减少，产蛋率可从90％降至20％以下，甚至绝产，对商品肉鸡可导致30％左右死亡，极易与大肠杆菌混合感染，严重影响家禽的生产性能，给养禽业带来严重的经济损失。更重要的是，该亚型AIV可以穿越宿主障碍感染哺乳动物包括人，也有机会在人类大流行，给人类健康带来了严重的威胁。目前H9N2亚型是我国鸡群中存在的AIV主要亚型，占禽流感总发病率的90％以上。各种防控措施中，疫苗免疫为最重要的措施。目前，虽然H9亚型禽流感灭活疫苗已广泛应用，该病也得到了有效控制，但是近几年来H9亚型禽流感在免疫鸡群中时有发生。为此，通过高适应载体表达高质量的有效抗原同时减少原有的生产成本达到针对同源/非同源H9亚型AIV流行株提供免疫保护的疫苗尤为必要。

我国的禽流感H9亚型主要是通过鸡胚尿囊腔接种流感病毒而获得，该生产体系具有一些缺陷，如大流行时疫苗的供给量往往受到SPF鸡胚数量的限制；有些毒株无法在鸡胚中复制，因此难以获得足够量的病毒，只有鸡胚适应株才能获得高产量病毒；受体结合特异位点的变异导致抗原性降低；疫苗生产下游技术一成不变且十分繁重、易于污染等等。利用动物传代细胞生产禽流感疫苗，能够在短期内大量增殖病毒，且无外源因子污染，能较好的维持病毒抗原稳定，弥补传统鸡胚生产体系的诸多不足。

国内外现在采用的动物传代细胞培养禽流感病毒主要是MDCK细胞，且在培养过程中需要添加一定量的胰蛋白酶，这对大规模生产带来一些繁琐，而采用本专利所述的动物传代细胞LMH细胞在培养流感病毒时无需添加胰蛋白酶，且培养出的流感病毒血凝价和免疫原性明显好于MDCK细胞培养的。

禽I群腺病毒是家禽常见的感染病原体，呈世界性分布，目前发现所有年龄的家禽均易感，只是鉴于家禽的品种、年龄所形成的致病力不同。目前发现禽I群腺病毒对鸡具有强致病性，临床上常常出现包涵体肝炎及心包积液-肝炎综合征，该病可直接引发养鸡场20-40天龄鸡只出现30％以上的死亡率，此外其临床上也常常与传染性支气管炎病毒，呼肠孤病毒，H9亚型禽流感病毒等并发感染，导致种蛋鸡出现明显呼吸道病，关节炎，及严重的产蛋下降及畸形蛋等问题。因此目前该病已经成为严重影响养鸡场生产性能的重大疫病之一。

禽I群腺病毒中的禽腺病毒4型(FAV-4)目前是世界上的研究热点，其具备高致病性，可直接引发的心包积液-肝炎综合征(或安卡拉病)，该病于1987年首发于巴基斯坦，在不到一年的时间内殃及整个巴基斯坦肉鸡养殖企业，之后在科威特、伊朗、前苏联，日本，中南美洲及墨西哥等地具有发生，甚至该病在鸽子也曾大面积爆发。

禽呼肠孤病毒在全球的感染十分普遍，病毒可感染鸡、火鸡及其他禽类。病毒性关节炎主要发生于肉鸡，也可发生于蛋鸡和火鸡。病毒的易感性与年龄有关，日龄越大易感性越低，1日龄雏鸡最易感，16周龄以后显著降低。传播途径分为垂直传播与水平传播两种方式，其中垂直传播的几率比较低，不同毒株的水平传播能力差异较大，病毒可长期存在于盲肠扁桃体和跗跖关节内，因此带毒鸡是潜在的接触感染源。

目前，禽白血病已经呈世界性分布,欧洲、亚洲、非洲、南美洲、北美洲的一些国家和地区均有禽白血病的发生,如荷兰、瑞士、德国、法国、捷克、英国、美国、朝鲜、韩国、日本、澳大利亚、马来西亚、哥斯达黎加、以色列、伊朗等很多国家和地区报道了禽白血病的发生，严重危害了这些国家的养鸡业的发展。