[发明专利]一种不饱和脂肪酸固相微萃取方法

权利要求书

1.一种不饱和脂肪酸固相微萃取方法，其特征在于：所述的固相微萃取方法是以银纳米粒固定化整体柱作为固相微萃取整体柱，结合管内固相微萃取-高效液相色谱联用系统，建立不饱和脂肪酸固相微萃取方法；所述的银纳米粒固定化整体柱是基于粘多糖功能化整体柱制备的，先由粘多糖、尿素溶液、甲醛溶液在催化剂溶液作用下原位脱水缩聚制备粘多糖功能化整体柱；再制备性能稳定、分散性良好的球形银纳米粒溶液，在微量注射泵辅助下，将银纳米粒固定化到粘多糖功能化整体柱表面。

2.根据权利要求1所述的一种不饱和脂肪酸固相微萃取方法，其特征在于：所述不饱和脂肪酸为食品中常用不饱和脂肪酸的甲酯化衍生产物。

3.根据权利要求2所述的一种不饱和脂肪酸固相微萃取方法，其特征在于：所述不饱和脂肪酸具体为顺-6-十八碳烯酸甲酯、反-6-十八碳烯酸甲酯、顺-9-十八碳烯酸甲酯、反-9-十八碳烯酸甲酯、顺-9,顺-12-十八碳二烯酸甲酯、顺-9,反-12-十八碳二烯酸甲酯、反-9,顺-12-十八碳二烯酸甲酯、反-9,反-12-十八碳二烯酸甲酯中一种或几种。

4.根据权利要求1所述的一种不饱和脂肪酸固相微萃取方法，其特征在于：所述的管内固相微萃取-高效液相色谱联用系统由微萃取和分析两部分组成；微萃取部分包括：一个六通阀-V1、一台液相色谱输液泵-泵A、0.5 mL PEEK管定量环；分析部分包括：一台液相色谱输液泵-泵B、一个六通阀-V2、银纳米粒固定化固相微萃取整体柱、分析柱、检测器。

5.根据权利要求1所述的一种不饱和脂肪酸固相微萃取方法，其特征在于：所述的固相微萃取具体操作步骤如下：

1)首先，六通阀V1和V2都在LOAD位置；装载液通过泵A平衡银纳米粒固定化固相微萃取整体柱，流速为0.1 mL/min；流动相通过泵B直接经分析柱以获得色谱分离需要的稳定基线，流速为1.0 mL/min；同时，通过进样针将样品溶液注满定量环；

2)当六通阀V1调至INJECT位置，固相微萃取开始，定量环中的样品经由装载液带入固相微萃取整体柱，经过给定的时间，六通阀V1调回LOAD位置，装载液继续冲洗固相微萃取整体柱90 s以消除残留的样品溶液，降低其干扰；

3)然后，泵B流速设置为0.1 mL/min，六通阀V2调节至INJECT位置，利用流动相将固相微萃取整体柱上富集的分析对象顺序洗脱；当洗脱完成时，六通阀V2调节至LOAD位置，设置泵B流速为1.0 mL/min进行分析检测。

6.根据权利要求5所述的一种不饱和脂肪酸固相微萃取方法，其特征在于：其中，所述的装载液组成为：按体积分数比计，正己烷/异丙醇=95%/5%；所述的流动相为正己烷；所述的分析柱为氨基色谱柱。