[发明专利]一种利用胃磨鉴定虾蟹类年龄的方法在审
申请号: | 201710564807.1 | 申请日: | 2017-07-12 |
公开(公告)号: | CN107328778A | 公开(公告)日: | 2017-11-07 |
发明(设计)人: | 刘必林;倪震宇;蒋瑞;舒畅;张健;林静远;李建华;陈新军 | 申请(专利权)人: | 上海海洋大学 |
主分类号: | G01N21/84 | 分类号: | G01N21/84;G01N1/28;G01N1/36;G01N1/32;G01N1/44;G01N1/42 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人: | 陆惠中,王永伟 |
地址: | 201306 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 鉴定 虾蟹类 年龄 方法 | ||
1.一种利用胃磨鉴定虾蟹类年龄的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)标记:选取轭贲门骨,在第1齿与近端1/2处画一条切割线;
(2)包埋:将画有切割线的轭贲门骨平放于磨具中,倒入压克力粉和液体固化剂混合配置成的树脂溶液,使溶液覆盖整个模具,然后放置室温避光处待其硬化;
(3)切割:将包埋硬化后的树脂块以切割线为中心,将两侧多余的部分切除;
(4)固定:将切割后的树脂薄片一侧朝下,固定在载玻片上;
(5)打磨:将固定在载玻片上的树脂薄片另一侧打磨,先后以120、600、1200、2500目的水磨砂纸,先粗磨后细磨至切割线表面;
(6)抛光:将经打磨的树脂薄片抛光研磨面,除去油质和杂质,完成所述树脂薄片一面的研磨;
(7)将以上抛光好的树脂薄片连同载玻片放在加热台上加热直至树脂软化,取下树脂薄片,干燥后,将树脂薄片翻面,固定在载玻片上,然后重复(5)和(6)步骤直至截面的生长纹清晰可见;
(8)生长纹观察:计数钙化层内生长纹的数目。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤(1)标记之前对胃磨进行预处理,包括如下步骤:
(1)提取:揭开虾蟹类的头胸甲,将其整个胃取出,用手术剪刀剪开胃取出胃磨;
(2)清洗:用手术剪刀剪开胃磨并展开,用清水将胃磨表面清洗干净;
(3)去除结缔组织:用解剖剪刀和尖头镊子剔除与胃磨骨骼相连的结缔组织剔除;
(4)保存:将经步骤(3)处理的胃磨在-20℃下冷冻保存。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述步骤(8)中的生长纹计数步骤为:
(1)图片制作:将制作好切片置于载玻片上,用胶头滴管滴上清水;在连接有CCD的显微镜100×倍下对胃磨的生长纹进行拍照,用图像处理软件对所拍的图片分别进行拼图处理;
(2)生长纹计数:对100×倍下采集的图像对钙化层的生长纹进行数目计数。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法,在步骤(1)中用翼贲门骨或中贲门骨作为材料选取研磨平面,然后完成包埋、切割、固定、打磨、抛光和实施后续步骤。
5.根据权利要求1-3任一项所述的方法,其特征在于:所述的磨具是塑料模具。
6.根据权利要求1-3任一项所述的方法,其特征在于:所述压克力粉和液体固化剂的配置体积比为1:1-1:1.5。
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