[发明专利]柽柳的工业化组培快繁技术

权利要求书

1.一种用于多种柽柳的统一化组织培养快速繁殖的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)外植体：扦插盆栽苗抽出的新嫩枝条为外植体；

(2)外植体的消毒：选用75％C₂H₅OH和0.1％HgCl₂，消毒时间分别为30s、9min；

(3)增殖培养：消毒培养后的无菌苗，MS培养基为基本培养基，添加6-BA和NAA进行培养，培养40-50天；

(4)壮苗培养：将柽柳增殖培养产生的丛生苗转入MS培养基进行壮苗培养，培养15-25天；

(5)生根培养：经壮苗长高后的组培苗，剪成小段，采用无激素培养基进行生根培养，培养15-25天；

(6)炼苗移栽：炼苗基质为营养土添加少许沙子；炼苗时首先将组培瓶上封口膜松动但不打开，在温度为22±1℃，光强度800±100μmol·m^–2·s^–1的组培室进行炼苗两天，再将组培瓶的封口膜上轻轻打开少许缝隙后炼苗两天，接着将封口膜打开后盖在组培瓶上炼苗两天后进行移栽；移栽的前一天用多菌灵对移栽基质进行消毒，移栽时选择根长为1.5-2cm、生根条数为2-3条、生长健壮的组培苗进行移栽，移栽时将组培苗从培养基中取出，用清水将根部的培养基清洗干净，用多菌灵溶液浸泡根部15s，移栽到盛有灭过菌的基质中，移栽后覆膜培养，早晚喷水，一周后，覆盖膜打开少许，继续培养一周后，揭膜培养，保持土壤湿润，培养30天后移栽到大田；

步骤(3)-(5)中培养条件为：培养温度白天25±1℃，夜晚18±1℃，光照强度为200±100μmol·m^–2·s^–1，光照12-14h，黑暗10-12h；

所述柽柳为甘蒙柽柳(TamarixchinensisNakai)、红花多枝柽柳(TamarixhohenackeriBunge)、中国柽柳(TamarixchinensisLour.)；

步骤(3)中，甘蒙柽柳的最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L，中国柽柳的最适增殖培养基为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.7mg/L，红花多枝柽柳的最适增殖培养基为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.7mg/L。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，消毒过程中，以MS培养基为基本培养基，首先对剪取的柽柳嫩枝条进行清洗，清洗干净后用水冲洗，再把柽柳嫩枝条每段剪成3-4cm，用水冲洗30min后拿到超净环境内，先用无菌水冲洗三遍，然后用75％的酒精浸泡一定时间，再用0.1％升汞浸泡一定时间，接着用无菌水冲洗4-5次，吸干外植体表面的水，剪去茎段上下各5mm的部分，下端剪成斜面，插到MS培养基中。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，增殖培养45天。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述无激素培养基为MS培养基或1/2MS。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述无激素培养基为MS培养基。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)、(5)中各培养20天。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(6)中，炼苗基质选用营养土添加1/10的沙子。