[发明专利]抗除草剂蛋白及其基因在植物育种中的应用在审
申请号: | 201710568506.6 | 申请日: | 2017-07-13 |
公开(公告)号: | CN107267480A | 公开(公告)日: | 2017-10-20 |
发明(设计)人: | 王峥;周宽基;李健;马力耕;邓兴旺 | 申请(专利权)人: | 未名兴旺系统作物设计前沿实验室(北京)有限公司 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/82;A01H5/00 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 除草剂 蛋白 及其 基因 植物 育种 中的 应用 | ||
1.一种具有除草剂抗性的AHAS突变体,其特征在于所述AHAS突变体的核苷酸序列选自下列组的序列之一:
(a)所述AHAS突变体的核苷酸编码的氨基酸序列上含有突变位点S621N突变;
(b)所述AHAS突变体的核苷酸序列上含有突变位点G1862A;
(c)所述AHAS突变体的核苷酸序列所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2或6所示;或
(d)所述AHAS突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1 或5所示。
2.根据权利要求1所述的AHAS突变体,其特征在于所述AHAS突变体还包含S653N、W574L、A122T和/或A155T等突变位点。
3.一种表达盒、载体或细胞,其特征在于所述表达盒、载体或细胞包含权利要求1-2之任一所述的AHAS突变体的核苷酸序列。
4.一种米制品,其包含权利要求1~2之任一所述的AHAS突变体。
5.权利要求1~2之任一所述的AHAS突变体、权利要求3所述的表达盒、载体或细胞,在获得具有除草剂抗性的植物中的应用,优选其中除草剂是AHAS抑制剂类除草剂,更优选是咪唑啉酮类除草剂。
6. 一种使植物获得除草剂抗性的方法,其特在于所述除草剂抗性可以通过以下方法之一获得:
a) 通过突变植物内源的AHAS基因,使该植物体产生对AHAS抑制剂类除草剂具有抗性的G1862A突变位点;或
b)将具有除草剂抗性的AHAS突变体核苷酸序列SEQ ID NO:1或5,通过转基因的方法转入目标植株,使目标植株获得对AHAS抑制剂类除草剂抗性;或
c)通过杂交、转育、回交等方法,将已获得的AHAS突变植株中的G1862A突变位点转移到目标植株中,使目标植株获得对AHAS抑制剂类除草剂的抗性。
7.根据权利要求6所述的方法,其中所述的突变选自下列方法之一:物理或化学方法导致的基因突变,化学方法包括用EMS等诱变剂处理所导致的诱变,所述突变还可以是点突变,也可以是DNA缺失或插入突变,还可以是通过RNAi、基因定点突变等基因沉默手段产生,所述基因定点突变方法包括但不限于ZFN定点突变方法、TALEN定点突变方法、和/或CRISPR-Cas9等基因组定点突变方法。
8.根据权利要求6或7所述的方法,其中所述的植株内源AHAS基因或是外源转入的AHAS突变体所编码的氨基酸序列除了包含S621N突变位点外,还包含S653N、W574L、A122T和/或A155T等突变位点。
9.一种AHAS抑制剂类除草剂抗性植株的应用,所述除草剂抗性植株可以应用于杂交育种提纯,其特征在于:所述AHAS抑制剂类除草剂抗性植株中的AHAS突变体的核苷酸序列选自下列组的序列之一:
(a)所述AHAS突变体的核苷酸编码的氨基酸序列上含有突变位点S621N突变;
(b)所述AHAS突变体的核苷酸序列上含有突变位点G1862A;
(c)所述AHAS突变体的核苷酸序列所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2或6所示;或
(d)所述AHAS突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1 或5所示。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于其中所述的AHAS突变体所编码的氨基酸序列上还包含S653N、W574L、A122T和/或A155T等突变位点。
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