[发明专利]一种高尔基银染神经组织的冰冻切片方法有效
申请号: | 201710568588.4 | 申请日: | 2017-07-13 |
公开(公告)号: | CN107271241B | 公开(公告)日: | 2018-07-31 |
发明(设计)人: | 刘镭;杨昭云;李卉;魏稼黎;钟峰;戴如平 | 申请(专利权)人: | 中南大学湘雅二医院 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/30 |
代理公司: | 长沙朕扬知识产权代理事务所(普通合伙) 43213 | 代理人: | 何湘玲;周孝湖 |
地址: | 410004 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高尔基 神经 组织 冰冻 切片 方法 | ||
1.一种高尔基银染神经组织的冰冻切片方法,包括以下步骤:
(1)将质量体积比浓度均为4%~6%的重铬酸钾、氯化汞和铬酸钾水溶液按照体积比1:(0.8~1.2):(0.8~1.2)的比例混合,得高尔基银染溶液;
(2)将待染色的神经组织浸泡在高尔基银染溶液中,其中神经组织与高尔基银染溶液的体积比为1:(4~6),避光放置,浸泡12h~24h,然后更换高尔基银染溶液,继续浸泡7天~14天;
(3)将浸泡后的神经组织置于含甘油10%~20%V/V、含蔗糖15%~20%W/V的甘油-蔗糖混合溶液中进行脱水;
(4)利用冰冻切片机将脱水后的神经组织进行切片。
2.根据权利要求1所述的高尔基银染神经组织的冰冻切片方法,其特征在于,所述步骤(4)中,对神经组织进行切片后,将切片置于明胶包被的载玻片上,放置过夜,然后将放置过夜的切片依次进行氨水显影、硫代硫酸钠分化、梯度酒精脱水、二甲苯透明和中性树脂封片。
3.根据权利要求1所述的高尔基银染神经组织的冰冻切片方法,其特征在于,所述步骤(3)中,所述脱水的时间为24h~72h。
4.根据权利要求1所述的高尔基银染神经组织的冰冻切片方法,其特征在于,所述步骤(4)中,所述神经组织为脑组织,所述冰冻切片机的切片温度为-18℃~-23℃。
5.根据权利要求1所述的高尔基银染神经组织的冰冻切片方法,其特征在于,所述步骤(4)中,所述切片的厚度为100μm~200μm。
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