[发明专利]维生素C在制备培养基中的用途有效
| 申请号： | 201710576758.3 | 申请日： | 2017-07-14 |
| 公开（公告）号： | CN107460169B | 公开（公告）日： | 2020-12-11 |
| 发明（设计）人： | 潘光锦;黄可;张田;李宇航;廖宝剑;薛燕婷 | 申请（专利权）人： | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 主分类号： | C12N5/0789 | 分类号： | C12N5/0789 |
| 代理公司： | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 赵天月 |
| 地址： | 510530 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 维生素 制备 培养基 中的 用途 | ||
1.一种促进胚胎干细胞或诱导多能干细胞造血分化的方法，其特征在于，包括：利用培养基培养所述胚胎干细胞或诱导多能干细胞，
其中，在培养的第0天，所述培养是在含有DMEM/F12、ITS、维生素C、BMP4以及ACTIVIN A的培养基中培养的；
在培养的第1天，所述培养是在含有DMEM/F12、ITS、维生素C、BMP4以及ACTIVIN A的培养基中培养的；
在培养的第2天和第3天，所述培养是在含有DMEM/F12、ITS、维生素C、bFGF以及VEGF的培养基中培养的；
在培养的第4天，所述培养是在含有DMEM/F12、ITS、维生素C、bFGF、VEGF以及SB431542的培养基中培养的；
基于100mL的所述DMEM/F12，所述ITS的用量为1mL，所述维生素C的用量不低于1mg。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述胚胎干细胞为H1。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述维生素C的用量为7mg。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述BMP4在所述培养基中的终浓度为50ng/mL，
任选地，所述ACTIVIN A在所述培养基中的终浓度为50ng/mL，
任选地，所述bFGF在所述培养基中的终浓度为50ng/mL，
任选地，所述VEGF在所述培养基中的终浓度为50ng/mL，
任选地，所述SB431542在所述培养基中的终浓度为10μM。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，预先将所述胚胎干细胞或诱导多能干细胞接种在12-well培养板中，所述胚胎干细胞或诱导多能干细胞的接种密度为1.5*105个/孔。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述12-well培养板预先铺有GrowthFactor Reduced Matrigel。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述接种后的胚胎干细胞或诱导多能干细胞预先在mTeSR1培养基培养过夜。
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