[发明专利]一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的制备及其应用有效
| 申请号： | 201710585267.5 | 申请日： | 2015-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN107227304B | 公开（公告）日： | 2019-06-04 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;谢艳萍 | 申请（专利权）人： | 湖南汇升生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/63;C12P19/12 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 421800 湖南省衡*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 麦芽 寡糖 海藻 合成 突变体 制备 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体，其特征在于，通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的蛋白表面疏水区域相关氨基酸残基进行取代后得到；所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述取代是将第106位甲硫氨酸突变为赖氨酸或组氨酸。
2.一种制备权利要求1所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）根据确定的突变位点，设计定点突变的突变引物，以携带麦芽寡糖基海藻糖合成酶基因的载体为模板进行定点突变；构建含编码突变体的基因的质粒载体；
（2）将突变体质粒转化进宿主细胞；
（3）挑选阳性克隆进行发酵培养，离心收集细胞，细胞破壁上清即为麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的粗酶液。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述质粒载体为pUC系列，pET系列，或pGEX中的任意一种。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞为细菌或真菌细胞。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的细菌为革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌。
6.编码权利要求1所述突变体的基因。
7.携带权利要求6所述基因的载体或重组细胞。
8.权利要求1所述突变体在制备海藻糖中的应用。
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