[发明专利]抗独特型抗体检测方法

权利要求书

1.一种抗独特型抗体检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

用包被缓冲液分别将样本溶液和阴性对照溶液稀释，得到样本稀释溶液和阴性对照稀释溶液，所述阴性对照溶液含有同型对照抗体，所述同型对照抗体用于消除由于抗独特型抗体非特异性结合而产生的背景染色；

将酶标板上的微孔分为样本孔和阴性孔，并将所述样本稀释溶液和所述阴性对照稀释溶液分别加入到所述样本孔和所述阴性孔中静置处理后，倒去所述样本稀释溶液和所述阴性对照稀释溶液；

在所述样本孔和所述阴性孔中依次加入封闭液进行封闭反应、标本稀释剂稀释的生物素-单抗和链霉亲和素-HRP进行连接反应、TMB底物显色液进行显色反应后，加入终止液，并用酶标仪测定所述样本孔和所述阴性孔中的光密度值得OD_样本、OD_阴性对照；

根据所述光密度值分析：当OD_样本/OD_阴性对照≥2.1时，所述样本溶液中含有所述单抗对应的抗独特性抗体，当OD_样本/OD_阴性对照＜2.1时，所述样本溶液中不存在所述单抗对应的抗独特性抗体。

2.如权利要求1所述的抗独特型抗体检测方法，其特征在于，所述包被缓冲液的PH＝9.6，且所述包被缓冲液含有1.59g/L的碳酸钠和5.86g/L的碳酸氢钠。

3.如权利要求2所述的抗独特型抗体检测方法，其特征在于，所述样本溶液的浓度为1mg/mL，且所述样本溶液与所述包被缓冲液按体积比(1:1000)-(1:10000)稀释得到所述样本稀释溶液。

4.如权利要求3所述的抗独特型抗体检测方法，其特征在于，所述样本孔中加入的所述样本稀释溶液的量为100ul/孔，且所述阴性孔中加入的所述同型对照抗体量为0.1ug/孔。

5.如权利要求1-4任一项所述的抗独特型抗体检测方法，其特征在于，所述静置处理的条件为：4℃，12-24h；或所述静置处理的条件为：室温，2h。

6.如权利要求1-4任一项所述的抗独特型抗体检测方法，其特征在于，所述封闭液的PH＝7.4，且所述封闭液含有PBST溶液和小牛血清白蛋白。

7.如权利要求1-4任一项所述的抗独特型抗体检测方法，其特征在于，所述标本稀释剂的PH＝7.4，且所述标本稀释剂含有HEPES、小牛血清白蛋白、氯化钠、吐温-20。

8.如权利要求1-4任一项所述的抗独特型抗体检测方法，其特征在于，所述生物素-单抗中的单抗为prM单抗。

9.如权利要求1-4任一项所述的抗独特型抗体检测方法，其特征在于，所述终止液为硫酸。

10.如权利要求1-4任一项所述的抗独特型抗体检测方法，其特征在于，所述封闭反应和所述连接反应结束后，均用PBST洗涤所述酶标板上的微孔。