[发明专利]一种高产β-1,3-葡聚糖枯草芽孢杆菌及其应用

权利要求书

1.一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株，其保藏号为：CGMCC No.12176。

2.权利要求1的枯草芽孢杆菌菌株，其16S rDNA序列如SEQ ID No：1所示。

3.一种制备β-1,3-葡聚糖的方法，包括将权利要求1的菌株发酵培养直接转化蔗糖合成β-1,3-葡聚糖，包括下列步骤：

a.将权利要求1的菌株接种于菌种活化培养基，静置恒温培养；

b.从菌种活化培养基上刮取活化的菌株转接到液体种子培养液培养，作为发酵培养的种子液；

c.将种子液接种到发酵培养液中，于发酵罐发酵，即得；

其中a步骤中，活化培养基中含KH₂PO₄ 0.3-1.0g/L、CaCl₂ 0.3-1.0g/L、MgSO₄ 0.6-1.2g/L、FeSO₄·7H₂O 0.6-1.2g/L、蔗糖3.0-8.0g/L和琼脂12.0-18.0g/L，活化培养基pH6.5-7.0；恒温培养温度为25-30℃；培养时间2-3天。

4.权利要求3的方法，其中b步骤中，液体种子培养液中含蛋白胨8.0-10.0g/L、酵母浸粉3.0-5.0g/L和氯化钠3.0-5.0g/L，液体种子培养液pH为7.0-7.8。

5.权利要求3的方法，其中b步骤中，在液体种子培养液中的培养温度为28-32℃、摇床中以150-300rpm的速度震荡培养48-72h，至培养液OD₆₀₀值在0.6-0.9之间时结束培养。

6.权利要求3的方法，其中c步骤中，发酵培养液中含蛋白胨0-3.0g/L、酵母浸粉0-1.5g/L和蔗糖120g/L，发酵培养液pH为7.0-7.8。

7.权利要求3的方法，其中c步骤中，种子液与发酵培养液的体积比为1:300～1:800。

8.权利要求3的方法，其中c步骤中，发酵罐发酵温度为25-35℃，发酵时间为5-9天。