[发明专利]食源性致病菌可视化检测探针及可视化检测方法在审

专利信息
申请号: 201710600610.9 申请日: 2017-07-21
公开(公告)号: CN107177697A 公开(公告)日: 2017-09-19
发明(设计)人: 张恒;张虹;赵现峰;牛娜;刘惠玲;涂晓波;黄欣迪 申请(专利权)人: 深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11
代理公司: 深圳市翼智博知识产权事务所(普通合伙)44320 代理人: 肖伟
地址: 518000 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 食源性 致病菌 可视化 检测 探针 方法
【权利要求书】:

1. 一种食源性致病菌可视化检测探针,其特征在于:包括:

在预先选定的作为目标菌候选检测位点的基因的第一区域设计及合成的SmartAmp引物探针,所述SmartAmp引物探针的5’端引入有第一活性基团并通过所述第一活性基团连接金纳米粒子以及预先确定的与所述目标菌相对应的荧光粒子;以及

在预先选定的作为目标菌候选检测位点的基因的第二区域设计及合成的荧光编码纳米探针,所述荧光编码纳米探针的5’端引入有第二活性基团并通过所述第二活性基团连接金纳米粒子以及预先确定的与所述目标菌相对应的荧光纳米粒子。

2.根据权利要求1所述的食源性致病菌可视化检测探针,其特征在于:在所述候选检测位点的基因的第二区域设计有多个荧光编码纳米探针结合位点,在每一个结合位点均设计及合成一个荧光编码纳米探针而构成多位点荧光编码纳米探针。

3.根据权利要求1所述的食源性致病菌可视化检测探针,其特征在于:所述第一活性基团和第二活性基团选自如下基团:氨基、巯基或羧基。

4.根据权利要求2所述的食源性致病菌可视化检测探针,其特征在于:所述多位点荧光编码纳米探针的碱基数为10-30个。

5.根据权利要求1所述的食源性致病菌可视化检测探针,其特征在于:所述荧光纳米粒子采用稀土荧光纳米粒子。

6.一种食源性致病菌可视化检测方法,其特征在于:包括:

预先选定作为目标菌的食源性致病菌的候选检测位点的基因;

在所述候选检测位点的基因的第一区域和第二区域分别设计及合成SmartAmp引物探针和荧光编码纳米探针获得可视化检测探针,所述SmartAmp引物探针的5’端借助于第一活性基团连接金纳米粒子以及预先确定的与所述目标菌相对应的荧光纳米粒子,所述荧光编码纳米探针的5’端借助于第二活性基团连接有金纳米粒子以及预先确定的与所述目标菌相对应的荧光纳米粒子;

利用可视化检测探针对待检样品进行SmartAmp扩增,然后在紫外灯照射下进行观察,根据观察到的荧光信号,确定所述待检样品中是否含有所述食源性致病菌;

在进行扩增后未能检测出含有食源性致病菌时,进一步利用可视化检测探针与待检样品进行杂交,然后再次在紫外灯照射下进行观察,根据观察到的荧光信号,确定所述待检样品中是否含有所述食源性致病菌。

7.根据权利要求6所述的食源性致病菌可视化检测方法,其特征在于:在所述候选检测位点的基因的第二区域设计有多个荧光编码纳米探针结合位点,在每一个结合位点均设计及合成一个荧光编码纳米探针而构成多位点荧光编码纳米探针。

8.根据权利要求6所述的食源性致病菌可视化检测方法,其特征在于:所述第一活性基团和第二活性基团选自如下基团:氨基、巯基或羧基。

9.根据权利要求7所述的食源性致病菌可视化检测方法,其特征在于:所述多位点荧光编码纳米探针的碱基数为10-30个。

10.根据权利要求6所述的食源性致病菌可视化检测方法,其特征在于:所述荧光纳米粒子采用稀土荧光纳米粒子。

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