[发明专利]用于雷替曲塞合成质量控制的检测分析方法

说明书

本发明公开了一种用于雷替曲塞合成质量控制的检测分析方法，包括起始原料6‑溴甲基‑3,4‑二氢‑2‑甲基‑喹唑啉‑4‑酮的纯度检测、起始原料5‑硝基‑2‑噻吩甲酸的纯度检测、雷替曲塞含量测定、雷替曲塞中6‑溴甲基‑3,4‑二氢‑2‑甲基‑喹唑啉‑4‑酮、6‑羟甲基‑3,4‑二氢‑2‑甲基‑喹唑啉‑4‑酮及5‑硝基‑2‑噻吩甲酸含量检测以及雷替曲塞对映异构体检测。本发明的方法具备灵敏度高、专属性强的特点，可以快速、准确地对雷替曲塞的合成工艺进行质量控制，从而保证雷替曲塞原料药的质量。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种用于雷替曲塞合成质量控制的检测分析方法。

背景技术

雷替曲塞是由英国的Royal Marsden医院的癌症研究署与Zeneca共同合作开发的药物。它是一种胸腺核苷酸合成酶抑制剂，属于叶酸的衍生物，用于治疗晚期直肠结肠癌患者。1996年在英国首次上市，商品名Tomudex，同年在法国等国家上市。其作为晚期结直肠癌的一线治疗药物，具有毒副作用小、给药方便、价格便宜等优点，在中国的需求量大。

雷替曲塞的合成方法有多种，常用的合成路线如下：

在该路线中，以5-硝基-2-噻吩甲酸为起始原料，经酰氯化、酰胺化、硝基还原、甲基化得到中间体IV，中间体IV再与6-溴甲基-3,4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮发生反应得到中间体V，中间体V水解即得雷替曲塞。

5-硝基-2-噻吩甲酸与6-溴甲基-3,4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮是该路线的两个起始原料，在合成过程中发明人发现在5-硝基-2-噻吩甲酸中易混入杂质5-硝基-2-噻吩甲醛和4-硝基-2-噻吩甲酸，而在6-溴甲基-3,4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮原料中易混入6-羟甲基-3,4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮(下称杂质E)和2,6-二甲基-3,4-二氢-喹唑啉-4-酮(下称杂质X)。因此，需要对这两个起始原料的纯度进行质量控制以保证后续反应的顺利进行以及终产品的质量。

雷替曲塞的结构中有一个手性碳中心，在化学合成中会产生R-对映异构体。R-对映异构体无药效作用，因此在雷替曲塞终产品中需要作为杂质进行控制。

针对起始原料6-溴甲基-3,4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮，现有的质量控制手段包括薄层色谱法和沉淀滴定法两种。薄层色谱法检测专属性较差，检测灵敏度不高，部分杂质存在被漏检的可能性。沉淀滴定法测含量主要是通过氧瓶燃烧，将6-溴甲基-3,4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮中的溴元素转变成溴离子，然后用硝酸银滴定液滴定来测定其含量。实验过程中本申请发明人发现，6-溴甲基-3,4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮中的溴比较活泼，容易转变成其它化合物，滴定法测定的为总溴含量，方法专属性差，且氧瓶燃烧操作比较繁琐，不利于该物料的质量控制。目前尚无文献报道通过高效液相色谱法测定6-溴甲基-3,4-二氢-2-甲基-喹唑啉-4-酮的纯度。

针对5-硝基-2-噻吩甲酸，目前也尚未检索到通过高效液相色谱法测定其纯度的。

对于手性药物而言，对光学异构体进行质量控制一直是药学研究工作的重点和难点。文献CN101221147A公开了一种毛细管电泳法检测雷替曲塞对映异构体的方法。但并无文献报道通过高效液相色谱法检测其对映异构体的。

发明内容

本发明要解决的技术问题是建立一种用于雷替曲塞合成工艺质量控制的检测分析方法，能够对雷替曲塞合成过程中的原料、终产品进行质量控制，从而保证合成过程的质量可控性。