[发明专利]甾醇类半抗原‑碱性磷酸酶交联物的制备方法及其应用

权利要求书

1.甾醇类半抗原-碱性磷酸酶交联物的制备方法，包括以下步骤：

1)将式1所示含羧基的甾醇类半抗原与式2所示碳二亚胺类化合物反应得到式3所示O-酰基异脲中间体；

2)将步骤1)得到的O-酰基异脲中间体体与式4所示的N-羟基琥珀酰亚胺磺酸盐反应，得到式5所示的N-羟基琥珀酰亚胺中酯中间体；

3)将步骤2)得到N-羟基琥珀酰亚胺中酯中间体与碱性磷酸酶进行交联反应，得到式6所示的甾醇类半抗原-碱性磷酸酶交联物；

其中，R为甾醇类化合物；

R¹是取代或未取代的C_2-10烷基，优选C_2-6烷基，更优选C_2-3烷基，所述烷基由选自以下的取代基任选取代：卤素、羟基、硫基、氰基、硝基、C_1-3烷基、C_6-10芳基、C_1-3烷氧基、C_5-7杂环基和C_1-3卤代烷基；

R²是取代或未取代的环己烷基、异丙烷基、二甲基氨丙基团和吗啉乙基，取代基任选取代：卤素、羟基、硫基、氰基、硝基、C_1-3烷基、C_6-10芳基、C_1-3烷氧基、C_5-7杂环基和C_1-3卤代烷基；

ALP为碱性磷酸酶。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，式1所示含羧基的甾醇类半抗原是：

6位修饰了O-羧甲基肟结构的式II所示雌激素类化合物：

其中，R³是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

R⁴是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

R⁵是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

R⁶是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

R⁷是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

或为：

6位修饰了O-羧甲基肟结构的式III所示雄激素类化合物：

其中，R⁸是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

R⁹是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

R¹⁰是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

R¹¹是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

或为：

6位修饰了O-羧甲基肟结构的式IV所示孕激素类化合物：

其中，R¹²是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

R¹³是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

R¹⁴是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基、取代或未取代的C_1-3烷氧基；

或为：

6位修饰了O-羧甲基肟结构的式V所示盐皮质激素类化合物：

其中，R¹⁵是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基、取代或未取代的C_2-3烯基、取代或未取代的C_2-3炔基，取代或未取代的C_1-3烷氧基；

R¹⁶是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基链，取代或未取代的C_2-3烯基，取代或未取代的C_2-3炔基，取代或未取代的C_1-3烷氧基；

R¹⁷是羟基、氢、取代或未取代的C_1-3烷基链，取代或未取代的C_2-3烯基，取代或未取代的C_2-3炔基，取代或未取代的C_1-3烷氧基。