[发明专利]一种同时检测多杀性巴氏杆菌及其荚膜A型双重实时荧光定量PCR方法的引物及应用在审
申请号: | 201710612652.4 | 申请日: | 2017-07-25 |
公开(公告)号: | CN107164557A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 郭东春;曲连东;刘家森;刘大飞;姜骞 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所23109 | 代理人: | 侯静 |
地址: | 150001 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 检测 多杀性巴氏 杆菌 及其 荚膜 双重 实时 荧光 定量 pcr 方法 引物 应用 | ||
1.一种同时检测多杀性巴氏杆菌及其荚膜A型双重实时荧光定量PCR方法的引物及应用,其特征在于,所述的引物包括上、下游引物和Taqman探针引物,具体如下:
针对多杀性巴氏杆菌的引物及探针序列如下:
上游引物Kmt-F:5'-GCTYGTTGTGAGTGGGCTTGT-3';
下游引物Kmt-R:5'-GCCGTTGTCAAGGAAGCAGAT-3';
探针引物Kmt-P:5'FAM-TTTGTTGGGCRGAGTTTGGTG-BHQ1 3';
针对荚膜A型的引物及探针序列如下:
上游引物CapA-F:5'-GGGCTGGCTATGTTGGTTTAT-3';
下游引物CapA-R:5'-CTTTATCTGTGATGGGCGATT-3';
探针引物CapA-P:5'HEX-TAGCTCAACACCACAATGTGATCT3'。
2.根据权利要求1所述的一种同时检测多杀性巴氏杆菌及其荚膜A型双重实时荧光定量PCR方法的引物及应用,其特征在于:PCR反应体系为20μl;
PCR反应条件:95℃5min;95℃15sec,53℃20sec,72℃30sec,35循环:最后72℃10min。
3.一种同时检测多杀性巴氏杆菌及其荚膜A型双重实时荧光定量PCR方法的引物及应用,其特征在于,将如权利要求1所述的引物应用到检测多杀性巴氏杆菌及及其荚膜A型中。
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