[发明专利]一种铁皮石斛内生真菌菌株及其产生的胞外多糖以及该胞外多糖的提取方法与应用

权利要求书

1.一株铁皮石斛内生真菌菌株，其特征在于，所述菌株为甘蔗镰刀霉菌（Fusarium solani ） SCUT951，其于2017年6月2日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO.M2017299。

2.一种由权利要求1所述的铁皮石斛内生真菌菌株产生的胞外多糖的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将所述铁皮石斛内生真菌菌株活化培养后，进行种子液培养，再将得到的种子液进行发酵培养；所述活化培养是采用试管斜面培养方法，于28±1℃条件下培养48~72小时；

其中，所述活化培养基限定为马铃薯葡萄糖琼脂培养基；所述种子液培养是限定为马铃薯葡萄糖水培养基，培养条件为：28±1℃、120 rpm和48~72小时；所述发酵培养是指按体积比为5%～15%的接种量将种子液接种于马铃薯葡萄糖水培养基中，于28±1℃、120 rpm摇床发酵培养7~14天，其中发酵培养基限定为马铃薯葡萄糖水培养基；

（2）将步骤（1）发酵培养后得到的发酵液采用布氏漏斗真空抽滤，收集抽滤液进行真空浓缩、醇沉、离心，将离心得到的沉淀脱水、干燥后，溶于去离子水中进行透析，对透析液进行真空冷冻干燥，冻干粉即为所述铁皮石斛内生真菌胞外多糖。

3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述真空浓缩是采用旋转蒸发仪于45℃将抽滤液浓缩为原液的1/10体积。

4.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述醇沉的具体操作为采用浓缩液：95%乙醇=1:4的体积比震荡混合均匀，于4℃静置12~24小时；所述95%是指体积百分比。

5.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述离心指在8000 rpm离心15分钟。

6.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述脱水处理是依次采用无水乙醇、丙酮和石油醚洗涤进行脱水处理；所述干燥是在温度50~55℃下进行干燥。

7.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，将离心得到的沉淀脱水、干燥后，以0.05~0.2g/mL的浓度溶于去离子中进行透析；所述透析是采用截留分子量3500Da透析袋蒸馏水透析24~72小时。