[发明专利]睾丸酮丛毛单胞菌HHALA-001及采用该菌株生产L-丙氨酸的方法有效
| 申请号： | 201710623651.X | 申请日： | 2017-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN107267422B | 公开（公告）日： | 2021-03-30 |
| 发明（设计）人： | 郭恒华;张冬竹;田宋魁;章晖 | 申请（专利权）人： | 安徽华恒生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12P13/06;C12R1/01 |
| 代理公司： | 合肥诚兴知识产权代理有限公司 34109 | 代理人： | 汤茂盛 |
| 地址： | 230000 安徽*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 睾丸酮 丛毛单胞菌 hhala 001 采用 菌株 生产 丙氨酸 方法 | ||
1.一种睾丸酮丛毛单胞菌HHALA-001生产L-丙氨酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：
活化斜面培养基(g/L)：蛋白胨8.0，氯化钠5.0，酵母膏或酵母粉3.0，牛肉膏5.0，琼脂15，调节pH 7.0-7.2；
摇瓶种子培养基(g/L)：谷氨酸钠15.0，复合氮素10.0，玉米浆干粉6.0，七水硫酸镁0.25，磷酸氢二钾0.2，磷酸二氢钾0.2，富马酸0.8，硫酸铵1.0，用氢氧化钠溶液调pH 7.0-7.2；
发酵培养基(g/L)：复合氮素10.0，酵母膏1.0，玉米浆干粉4.0，谷氨酸钠12.0，七水硫酸镁0.1，硫酸铵0.8，一水柠檬酸2.0，磷酸氢二钾0.2，磷酸二氢钾0.5，富马酸1.0，用氢氧化钠溶液调pH 7.0-7.2；
取睾丸酮丛毛单胞菌HHALA-001斜面菌种一环接到斜面培养基上，睾丸酮丛毛单胞菌HHALA-001菌种保藏编号为：CGMCC No.14064，30℃±1℃培养20h；再取菌种一环接到200mL摇瓶培养基，180rpm，28℃培养24h，合并各瓶培养液，得到2L-5L种子培养液，接种到2吨发酵罐中，28℃，150rpm，通气量30m3/h培养24h，获得具有高L-天冬氨酸-β-脱羧酶活力的游离细胞培养液2m3，L-天冬氨酸-β-脱羧酶活力12.1U，以此培养液生物转化L-天冬氨酸生成L-丙氨酸，投入6.2吨L-天冬氨酸，32h生成L-丙氨酸4.14吨，转化率为99.9％。
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