[发明专利]一种枸杞多糖‑铬配合物的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种枸杞多糖-铬配合物的制备方法，其特征在于：所述枸杞多糖与铬自组装反应形成配合物，配合物中铬所占质量分数为5-7%，制备方法包括如下步骤：

（1）枸杞粗多糖经提纯处理后得到纯化后的枸杞多糖；

（2）将步骤（1）纯化后的枸杞多糖于60℃下溶解于水中，随后在70~90℃水浴条件下将枸杞多糖溶液调节pH=6~9，在不出现沉淀的情况下，用胶头滴管缓慢滴加CrCl₃水溶液和NaOH溶液，注意维持溶液的pH=6~9；直到溶液中出现絮状沉淀再滴3~5滴CrCl₃水溶液，保持70℃～90℃加热3h；

（3）将步骤（2）所得溶液进行离心并取上清液，加入95 wt%乙醇，冷却静置离心收集沉淀；分别用无水乙醇、丙酮和乙醚搅拌振荡洗涤沉淀物并减压干燥，获得浅绿色枸杞多糖-铬配合物粗品；

（4）将步骤（3）所得枸杞多糖-铬配合物粗品溶于水中，并装入预处理后的透析袋中透析过夜，透析后样品浓缩冷冻干燥，得到纯化后的枸杞多糖-铬配合物。

2.根据权利要求1所述的枸杞多糖-铬配合物的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述枸杞粗多糖的提纯处理，具体包括以下步骤：

（A）磷酸缓冲液配制：甲液：准确称取3.121 g二水磷酸二氢钠，100 mL容量瓶定容；乙液：准确称取1.764 g十二水合磷酸氢二钠，100 mL容量瓶定容；将39.0 mL甲液与61.0 mL乙液混合后配制成pH=7.0的磷酸缓冲液，备用；

（B）酶溶液的配制：准确称取0.1g胰蛋白酶，磷酸缓冲液10 mL，在37℃水浴锅内溶解，得到10mg/mL的胰蛋白酶溶液，备用；

（C）准确称取5g枸杞粗多糖溶于500mL步骤（A）配制的磷酸缓冲液中，加入2mL步骤（B）配制的胰蛋白酶溶液，置于37℃水浴锅内水浴加热3小时；

（D）将酶解后的粗多糖溶液置于沸水中灭酶10分钟，室温下冷却并离心弃去沉淀，上清液加入2mL的Sevage溶液，摇床以100r/min的速率摇10min并静置30min，离心后取上清液，再往上清液中加入2mL Sevage溶液，此过程分别重复3次；然后加入4倍体积95wt%乙醇，冷却静置离心收集沉淀；分别用无水乙醇、丙酮和乙醚搅拌荡洗涤沉淀物，离心收集沉淀并减压干燥，收集枸杞多糖；

（E）将步骤（D）得到的枸杞多糖溶于水中，并装入预处理后的透析袋中透析过夜，透析后样品浓缩冷冻干燥，得到纯化后的枸杞多糖。

3.根据权利要求2所述的枸杞多糖-铬配合物的制备方法，其特征在于：步骤（D）中的Sevage溶液是氯仿和正丁醇按照体积比为2~4:1混合而成。

4.根据权利要求1或2所述的枸杞多糖-铬配合物的制备方法，其特征在于：所述透析袋的预处理过程为：将透析袋放在2 wt%NaHCO₃和1 mmol/L EDTA的混合液中煮沸10min，蒸馏水洗净，再用1mmol/L的EDTA煮沸10min，冷却置于4℃冰箱备用；透析袋处理需要戴手套，处理后保证透析袋浸没于保存液之内。

5.根据权利要求1所述的枸杞多糖-铬配合物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中CrCl₃水溶液和NaOH溶液的浓度均为2 mol/L。

6.一种如权利要求1所述的制备方法制得的枸杞多糖-铬配合物在制备抗糖尿病毒的药物和保健食品中的应用。