[发明专利]一种枸杞多糖‑铬配合物的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种枸杞多糖-铬配合物的制备方法及其应用，属于医药领域。

背景技术

糖尿病是严重威胁人类生命健康的疾病，全世界都致力于糖尿病新型药物的研究与开发，寻找有效、安全、不良反应小的治疗糖尿病的药物一直是药物研发者的目标，从天然药物中寻找降血糖的有效成分是一条重要的途径。多糖有免疫调节、抗肿瘤、降血糖、抗氧化等作用。枸杞是药食两用中药，具有良好的降血糖功能。枸杞多糖是该功能活性成分，枸杞多糖可使糖尿病大鼠视网膜组织中抗坏血酸水平和SOD 活性明显下降，LPO含量明显增加，表明枸杞具有保护糖尿病大鼠视网膜组织氧化损伤的作用。据李长江等研究表明，枸杞多糖能在短时间内降低糖尿病小鼠餐后血糖水平，提高糖尿病小鼠的糖耐量；长期用枸杞多糖治疗糖尿病小鼠能够明显降低小鼠的血糖水平，并且其降血糖作用存在剂量依赖性，高剂量的降糖效果比优于低剂量。

铬是正常碳水化合物和脂类代谢所必需的微量元素，三价铬参与糖代谢，是维持动物及人体正常的葡萄糖耐量不可缺少的元素，无论是自然条件还是实验条件下，缺铬都可使组织对胰岛素的敏感性降低，胰岛素是糖代谢的核心物质，而胰岛素发挥作用，又必须有铬氧元素参加。过去是采用无机铬盐制剂来补充，但结果不能达到所期待的效果。

有机配体与金属离子形成螯合物后其性能将发发生较大变化，他不但能更好发挥原有配体和金属离子的功能，可能还具有其他的功能，如铬与烟酸螯合后形成的烟酸铬气吸收率大为提高，不但具有补充微量元素和烟酸的作用，而且还具有促进动物生长、提高瘦肉率、提高繁殖性能及增强机体免疫功能。很多的抗癌药物、抗生素与金属螯合以及多糖铁的合成应用也证明了这一点。

鉴于此，如果将枸杞多糖与金属离子螯合，其性能也必将发生很大的改善。由于多糖有丰富的羟基，是很好的配体，而Cr有空3d轨道是很好的中心离子，只要条件合适必将形成稳定的螯合物。本项目用枸杞多糖与Cr螯合形成枸杞多糖-Cr螯合物，研究其配位结构和抗糖尿病的效果。实验表明，枸杞多糖-铬配合物显著降低高血糖小鼠的血糖作用，其降血糖作用强于无机铬和枸杞多糖，在一定剂量下还优于格列本脲，因而可用于制备抗糖尿病的药物和保健食品中。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术不足，提供一种枸杞多糖-铬配合物的制备方法及其应用。本发明原料易得，配合物制备工艺简单，价廉，生产方便，开发价值高，制得的枸杞多糖-铬配合物能显著降低高血糖小鼠的血糖作用，可用于制备抗糖尿病的药物和保健食品中，为开发系列新型高效、安全、不良反应小的治疗糖尿病的药物以及活性多糖-金属螯合物的研究开发奠定基础。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种枸杞多糖-铬配合物的制备方法，所述枸杞多糖与铬自组装反应形成配合物，配合物中铬所占质量分数为5-7%，制备方法包括如下步骤：

（1）枸杞粗多糖经提纯处理后得到纯化后的枸杞多糖；

（2）将步骤（1）纯化后的枸杞多糖于60℃下溶解于水中，随后在70~90℃水浴条件下将枸杞多糖溶液调节pH=6~9，在不出现沉淀的情况下，用胶头滴管缓慢滴加CrCl₃水溶液（浓度为2 mol/L）和NaOH溶液（浓度为2 mol/L），注意维持溶液的pH=6~9；直到溶液中出现絮状沉淀再滴3~5滴CrCl₃水溶液，保持70℃～90℃加热3h；

（3）将步骤（2）所得溶液进行离心并取上清液，加入95 wt%乙醇，冷却静置离心收集沉淀；分别用无水乙醇、丙酮和乙醚搅拌振荡洗涤沉淀物并减压干燥，获得浅绿色枸杞多糖-铬配合物粗品；

（4）将步骤（3）所得枸杞多糖-铬配合物粗品溶于水中，并装入预处理后的透析袋中透析过夜，透析后样品浓缩冷冻干燥，得到纯化后的枸杞多糖-铬配合物。

步骤（1）中所述枸杞粗多糖的提纯处理，具体包括以下步骤：

（A）磷酸缓冲液配制：甲液：准确称取3.121 g二水磷酸二氢钠，100 mL容量瓶定容；乙液：准确称取1.764 g十二水合磷酸氢二钠，100 mL容量瓶定容；将39.0 mL甲液与61.0 mL乙液混合后配制成pH=7.0的磷酸缓冲液，备用；

（B）酶溶液的配制：准确称取0.1g胰蛋白酶，磷酸缓冲液10 mL，在37℃水浴锅内溶解，得到10mg/mL的胰蛋白酶溶液，备用；

（C）准确称取5g枸杞粗多糖溶于500mL步骤（A）配制的磷酸缓冲液中，加入2mL步骤（B）配制的胰蛋白酶溶液，置于37℃水浴锅内水浴加热3小时；