[发明专利]一步法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测人基质金属蛋白酶1的试剂盒在审
| 申请号： | 201710627448.X | 申请日： | 2017-08-08 |
| 公开（公告）号： | CN109402227A | 公开（公告）日： | 2019-03-01 |
| 发明（设计）人： | 邓结飞;杨培浩;其他发明人请求不公开姓名 | 申请（专利权）人： | 安徽普元生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 230088 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 试剂盒 人基质金属蛋白酶 实时荧光定量 结直肠癌 逆转录聚合酶链反应 实时荧光定量PCR 基质金属蛋白酶 定量检测 辅助诊断 交叉污染 手术切除 反转录 肝转移 一步法 标本 检测 管盖 治疗 科研 | ||
1. 一种通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测人基质金属蛋白酶1的试剂盒，含有逆转录聚合酶链反应液、莫洛尼氏鼠白血病病毒 (M-MuLV) 逆转录酶、RNA酶抑制剂、耐热性DNA聚合酶、标准品及阴阳性对照品。
2.其特征是：逆转录聚合酶链反应液含有焦炭酸二乙酯处理的水、逆转录聚合酶链反应缓冲液、寡聚(dT)15-18、dNTPs、MgCl2、检测用上游引物、检测用下游引物、荧光探针，其中：
检测用上游引物序列为
5’—GGTGCAGTGGCTCACACTTG—3’，
检测用下游引物序列为
5’—GGCTGGAGTGTAGTGGTACAATCTT—3，
荧光探针序列为
5’—FAM—CCTGTCTCTACTAAAAGTACA—TAMRA—3’
标准品序列为
AAAAATTAAATTATAGGCCAGGTGCAGTGGCTCACACTTGTAATCGCAGCACTTTGGGAGGCGGAGGCGGGGGAATCATTTGAGATCAGGAGTTCAAGACCAGCCTGGCCAATATGGTGAAACCCTGTCTCTACTAAAAGTACAAAAATTAGCTGGGCGTGTTGGCCTGTACCTGTAATCCCAGCTACTCAGGAGGCTGAGGCAGGAGAATCCTTGAATCTGGGAGGCAGAGGTTGCTCTGAGCCAAGATTGTACCACTACACTCCAGCCTGGGTGAGAGAGTGAGACTCTGTCTCAAAAAAGTAAATAAATAAAAAAGAGATAAAACTTAAAT。
3.如权利要求1所述的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测人基质金属蛋白酶1的试剂盒，其特征是：一、反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染。
4.二、对照品分阴性对照品和阳性对照品，其中阴性对照品为无人基质金属蛋白酶1mRNA的RNA样品，阳性对照品为有人基质金属蛋白酶1 (MMP1) mRNA的RNA样品。
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