[发明专利]促进罗汉果UGT73AF1基因表达的方法在审

专利信息
申请号: 201710629406.X 申请日: 2017-07-28
公开(公告)号: CN107372109A 公开(公告)日: 2017-11-24
发明(设计)人: 李华政;韦荣昌 申请(专利权)人: 李华政
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00;A01G1/00;A01G7/06
代理公司: 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙)11369 代理人: 靳浩
地址: 530002 广西壮族*** 国省代码: 广西;45
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摘要:
搜索关键词: 促进 罗汉果 ugt73af1 基因 表达 方法
【权利要求书】:

1.一种促进罗汉果UGT73AF1基因表达的方法,其特征在于,包括:

步骤一、罗汉果组培苗接种在含有茉莉酸甲酯的固体培养基中培养,其中,茉莉酸甲酯在固体培养基中的浓度为50-400μmol/L;培养期间,每隔3天将罗汉果组培苗从所述固体培养基中取出,用清水将根部冲洗干净,静置10分钟,之后再将罗汉果组培苗重新接种回所述固体培养基中;

步骤二、栽培所述步骤一培养得到的罗汉果植株,在栽培期间,将浓度为50-400μmol/L的茉莉酸甲酯喷洒于授粉后20-30d的罗汉果表面,至表面滴水为止,早、中、晚各喷洒一次,连续喷施5d。

2.如权利要求1所述的促进罗汉果UGT73AF1基因表达的方法,其特征在于,所述步骤一中,所述培养条件为:相对湿度60-66%、光照强度1400lux,光照时间8h/d,温度21-25℃条件下培养30d。

3.如权利要求2所述的促进罗汉果UGT73AF1基因表达的方法,其特征在于,所述的固体培养基配比为MS+6-BA 1.5mg/L,IBA 0.3mg/L,琼脂3.5g/L,蔗糖30g/l,活性炭1.0g/L。

4.如权利要求3所述的促进罗汉果UGT73AF1基因表达的方法,其特征在于,所述步骤一中,所述含有茉莉酸甲酯的固体培养基通过以下方式制备得到:用体积百分比浓度为2%的乙醇水溶液溶解茉莉酸甲酯,配制成10000μmol/L的茉莉酸甲酯母液,并用0.22μm的微孔滤膜灭菌,将灭菌后的茉莉酸甲酯母液添加到固体培养基中,至茉莉酸甲酯的最终浓度为50-400μmol/L,将固体培养基灭菌并冷却至24-26℃。

5.如权利要求1所述的促进罗汉果UGT73AF1基因表达的方法,其特征在于,还包括:

步骤三、利用qRT-PCR检测所述步骤二栽培得到的罗汉果果实中的UGT73AF1基因表达。

6.如权利要求5所述的促进罗汉果UGT73AF1基因表达的方法,其特征在于,所述步骤三中,采用改良Trizol法提取罗汉果果实总RNA。

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