[发明专利]一株大肠杆菌抗肿瘤靶向工程菌株及其构建方法与应用有效
| 申请号： | 201710631380.2 | 申请日： | 2017-07-28 |
| 公开（公告）号： | CN107574138B | 公开（公告）日： | 2020-09-15 |
| 发明（设计）人： | 夏立秋;何恋;丁学知;孙运军;胡胜标 | 申请（专利权）人： | 湖南师范大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/12;A61K48/00;A61K38/17;A61P35/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 长沙星耀专利事务所(普通合伙) 43205 | 代理人： | 宁星耀 |
| 地址： | 410081 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 大肠杆菌 肿瘤 靶向 工程 菌株 及其 构建 方法 应用 | ||
1. 一株大肠杆菌抗肿瘤靶向工程菌株，其特征在于，该大肠杆菌抗肿瘤靶向工程菌株EcN (Tum-5) 保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏号为C CTCC NO：M 2017345。
2.根据权利要求1所述的大肠杆菌抗肿瘤靶向工程菌株，其特征在于，所述大肠杆菌抗肿瘤靶向工程菌株能可溶性表达和分泌性表达肿瘤抑素Tumstatin的抗肿瘤血管生成活性区域Tum-5，并能特异性地靶向肿瘤低氧区域。
3.一种如权利要求1所述的大肠杆菌抗肿瘤靶向工程菌株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
（一）利用PCR拼接获得Tum-5基因
根据GenBank中登录的登记号为 AF258351.1的
（二）Tum-5诱导表达载体的构建及鉴定；
（三）Tum-5蛋白的诱导表达、纯化及鉴定；
（四）大肠杆菌抗肿瘤靶向工程菌株EcN (Tum-5)的构建。
4.如权利要求3所述的大肠杆菌抗肿瘤靶向工程菌株的构建方法，其特征在于，步骤（四）中，所述构建的步骤为，将低氧启动子Pvhb、SUMO促溶标签、抗血管生成因子Tum-5，通过重叠PCR技术获得包含三段基因序列的PCR产物，再利用酶切连接的方法将该PCR产物连接到载体pET-28a，电击转化
5.如权利要求1或2所述的大肠杆菌抗肿瘤靶向工程菌株在制备靶向抗肿瘤药物中的应用。
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