[发明专利]尿中1-溴丙烷代谢物N-乙酰基-S-(正丙基)-L-半胱氨酸的测定方法有效
申请号: | 201710631912.2 | 申请日: | 2017-07-28 |
公开(公告)号: | CN107389822B | 公开(公告)日: | 2020-06-19 |
发明(设计)人: | 缪荣明 | 申请(专利权)人: | 缪荣明 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 南京新慧恒诚知识产权代理有限公司 32424 | 代理人: | 王月霞 |
地址: | 214011 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 丙烷 代谢物 乙酰 丙基 半胱氨酸 测定 方法 | ||
1.尿中1-溴丙烷代谢物N-乙酰基-S-(正丙基)-L-半胱氨酸的测定方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)样品准备:取尿样,加入脲酶,25℃水浴震荡10~15min,离心,取上清液;
2)样品衍生化:移取上清,加入乙醇-吡啶混合液,混合;加入氯甲酸乙酯,涡旋混合30~90s,加入三氯甲烷充分震荡后分层;
3)气相色谱分析:取步骤2)中三氯甲烷层作为样品,进样,程序升温,根据峰面积依据工作曲线得出尿中N-乙酰基-S-(正丙基)-L-半胱氨酸的浓度;
其中:
步骤1)中所述尿样与脲酶的用量关系为:1mL尿样中加入0.2~2mg的脲酶;
步骤2)中所述上清与乙醇-吡啶混合液、氯甲酸乙酯、三氯甲烷的体积比为1:3:0.5:10;
步骤3)中所述程序升温为:初温110℃,保持2min,以15℃/min升温至290℃,保持3min。
2.根据权利要求1所述的尿中1-溴丙烷代谢物N-乙酰基-S-(正丙基)-L-半胱氨酸的测定方法,其特征在于,步骤1)中所述离心转速为15000rpm。
3.根据权利要求1所述的尿中1-溴丙烷代谢物N-乙酰基-S-(正丙基)-L-半胱氨酸的测定方法,其特征在于,步骤2)中所述乙醇-吡啶混合液中乙醇与吡啶的体积比为6:1。
4.根据权利要求1所述的尿中1-溴丙烷代谢物N-乙酰基-S-(正丙基)-L-半胱氨酸的测定方法,其特征在于,步骤3)中所述进样的进样口温度为260℃,进样量为1μL。
5.根据权利要求1所述的尿中1-溴丙烷代谢物N-乙酰基-S-(正丙基)-L-半胱氨酸的测定方法,其特征在于,步骤3)中所述工作曲线为:配置不同浓度的N-乙酰基-S-(正丙基)-L-半胱氨酸标准品溶液,经过样品准备和样品衍生化处理后,进样,以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标拟合而得。
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