[发明专利]促进罗汉果CYP26基因表达的方法

权利要求书

1.一种促进罗汉果CYP26基因表达的方法，其特征在于包括：

将罗汉果组培苗的根系中根长小于最长根长度1/2的短根剪除，再将2～3条粗壮根用无菌刀分别划2～3个伤口，再用介质包覆所述组培苗的根系，连续变温处理5次，然后进行磁化处理，最后将所述组培苗上的介质去除其中其中根系处理过程中添加茉莉酸甲酯浓度为1.0～2.0mg/L；

植株开花后对花粉进行特殊处理得到花粉液，用电动喷雾器将所述花粉液喷洒在开花的雌花植株进行人工授粉，其中花粉液中茉莉酸甲酯的浓度为0.5～1.0mg/L；

植株开花授粉后10天，连续喷洒7天的诱导液，其中所述诱导液中茉莉酸甲酯为0.5～1.0mg/L。

2.如权利要求1所述的促进罗汉果CYP26基因表达的方法，其特征在于，所述介质为处理过的玉米须，所述玉米须需要经洗净干燥，于25℃水温的预浸泡溶液浸泡处理2h，所述预浸泡溶液中含有1mg/L的纳米银、0.5mg/L BA、1g/L柠檬酸钠、3μg/L的生根粉、0.15g/L葡甘露聚糖，以去离子水为溶剂。

3.如权利要求1所述的促进罗汉果CYP26基因表达的方法，其特征在于，所述变温处理均为将所述组培苗先置于2℃下贮存1min，再置于25℃下贮存5min，其中处理条件为湿度为60～70％。

4.如权利要求1所述的促进罗汉果CYP26基因表达的方法，其特征在于，所述磁化处理为将所述组培苗置于磁化机内，设置磁场强度为200～250高斯，磁化时间为1h，磁化温度25～27℃。

5.如权利要求1所述的促进罗汉果CYP26基因表达的方法，其特征在于，所述组培苗移栽包括：

将组培苗用0.1％的高锰酸钾或10～50mg/L的新洁尔灭溶液浸泡灭菌；

将灭菌的组培苗移栽到灭菌的介质中，其中所述介质由20～30重量份蛭石、15～20重量份珍珠岩、10～15重量份粘沙、15～20重量份谷壳、10～15重量份锯木屑、以及10～15重量份磨菇渣组成；

移栽后在叶面喷洒10毫克/千克的ABT生根粉溶液一次，然后进行遮光5日。

6.如权利要求1所述的促进罗汉果CYP26基因表达的方法，其特征在于，将经诱导培养的罗汉果组培苗移栽后10～15日后的在根部滴灌培养液，每天滴灌三次，每隔5天滴灌一天，共进行6次，其中所述培养液中茉莉酸甲酯为1.0～2.0mg/L。

7.如权利要求1所述的促进罗汉果CYP26基因表达的方法，其特征在于，所述诱导液还包括300mg/L的芦丁素，诱导液2喷洒量为每株500g/次。

8.如权利要求1所述的促进罗汉果CYP26基因表达的方法，其特征在于，所述花粉为当日刚开放的雄花的花粉，获得方法为：在授粉日当天，采摘所述雄花，将蕊柱连同花粉剪下收集后，倒入100目的细铁丝筛中，用手轻轻揉搓，将花粉从蕊柱上脱离。

9.如权利要求8所述的促进罗汉果CYP4基因表达的方法，其特征在于，所述特殊处理的具体包括：

将收集的花粉进行干燥；采用吸湿干燥法，将硅胶置于花粉下方，封闭干燥机进行干燥24h；在花开的前一天晚上将干燥后，的花粉摊放在白纸的光面上，置于湿度为60～80％的加湿室内12-20小时进行吸湿活化处理；吸湿活化处理后的花粉按照2重量份花粉和8重量份喷雾液的比例混合，并用频率为3KHz的超声波振荡器中10分钟确保混合均一稳定，得到花粉液；

其中所述喷雾液的配方为0.1～0.3g/L硼酸、0.2％氨基酸水肥、0.15g/L葡甘露聚糖、0.02～0.06mg/L 2，4-D、0.5～1.0mg/L的茉莉酸甲酯，以磁化水为溶剂。

10.如权利要求1所述的促进罗汉果CYP4基因表达的方法，其特征在于，所述根系处理中还包括有0.05mg/L独角金内酯。