[发明专利]一种酶法提取金针菇多糖的方法

说明书

本发明公开了一种酶法提取金针菇多糖的方法，包括以下步骤：(1)将金针菇去除根部，清洗切块，粉碎，烦躁，过40‑60目筛；(2)将过筛的金针菇干粉加入去离子水，均匀搅拌；(3)将步骤(2)得到的金针菇溶液中加入木瓜蛋白酶，水解；(4)将步骤(3)水解后的溶液加入95％乙醇，沉淀，过滤，干燥，得成品。本发明可以高效的提取金针菇多糖。

技术领域

本发明涉及多糖提取方法，特别涉及一种酶法提取金针菇多糖的方法。

背景技术

金针菇又名冬菇、朴菇、构菌、青杠菌、毛柄金钱菌，隶属担子菌亚门，层菌纲，伞菌目，口蘑科，金钱菌属。金针菇多糖由于具有抑制肿瘤、抗癌、增强肌体免疫力等作用而广泛受到重视，如何提高金针菇多糖的提取率，降低成本已成为拓展金针菇使用范围、提高应用价值的关键。

传统的浸提法虽然是提取多糖的经典方法，但时间长、效率低、能耗大；研究表明中性蛋白酶能有效酶解与多糖结合在一起的蛋白质。从而将多糖释放出来而提高多糖的得率，同时降低了多糖中蛋白质的含量，提高了多糖的纯度。因此，探索更为高效、经济、可靠的提取方法对金针菇多糖的研究开发具有重要现实意义。

发明内容

发明目的：本发明提供了一种高效提取金针菇多糖的方法。

技术方案：本发明所述一种酶法提取金针菇多糖的方法，包括以下步骤：(1)将金针菇去除根部，清洗切块，粉碎，烦躁，过40-60目筛；(2)将过筛的金针菇干粉加入去离子水，均匀搅拌；(3)将步骤(2)得到的金针菇溶液中加入木瓜蛋白酶，水解；(4)将步骤(3)水解后的溶液加入95％乙醇，沉淀，过滤，干燥，得成品。

木瓜蛋白酶，是一种蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白水解酶，广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内，其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，属于巯基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点，因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。本发明中选用木瓜蛋白酶的原因是可以高效地水解金针菇细胞细胞壁上的蛋白，破坏植物细胞，水解程度高，提高金针菇多糖的提取效率。

步骤(2)中，所述金针菇干粉与去离子水质量比为1:10-30。所述搅拌速度为5000-7000转/min。所述搅拌时间为60-90min。

步骤(3)中，所述金针菇溶液与木瓜蛋白酶的质量比为20-30:1。

有益效果：本发明所述的方法适用于大规模的工业生产，产品纯化简单，活性损失较小，该方法金针菇多糖的提取方面将具有巨大的应用前景。

具体实施方式

一、原料来源

1、新鲜金针菇，市售；

2、木瓜蛋白酶，购自北京世纪时尚科贸有限公司。

二、检测方法

1、葡萄糖标准曲线

以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图。用苯酚一硫酸法测定多糖含量得葡萄糖标准曲线的回归方程。

2、金针菇多糖的检测方法

采用苯酚一硫酸比色法，硫酸一苯酚法是以硫酸、苯酚作为显色剂，与金针菇多糖发生显色反应，在490nm波长处测定吸光度，再通过已经测定的葡萄糖标准曲线计算求得金针菇中的多糖含量。

三、样品制备

实施例1：将金针菇去除根部，清洗切块，粉碎，烦躁，过40-60目筛；将过筛的金针菇干粉加入1:10去离子水，均匀搅拌，搅拌速度为5000转/min，搅拌时间为60min。将得到的金针菇溶液中加入质量比为20:1的木瓜蛋白酶，水解；将水解后的溶液加入95％乙醇，沉淀，过滤，干燥，得成品。