[发明专利]基于SCX/SAX混合填料的集成化蛋白质组学样品前处理平台及其应用

权利要求书

1.一种蛋白质组学样品前处理平台，其特征在于，所述蛋白质组学样品前处理平台包括移液枪枪头(1)、强阳离子交换树脂和强阴离子交换树脂混合填料(2)和固相萃取膜(3)；所述固相萃取膜(3)填充于移液枪枪头(1)的下端，强阳离子交换树脂和强阴离子交换树脂混合填料(2)填充于移液枪枪头(1)下端并位于固相萃取膜(3)之上；

所述蛋白质组学样品前处理平台进行混合填料活化的pH为3-12；

所述蛋白质组学样品前处理平台进行蛋白质上样的pH为3-12；

所述蛋白质组学样品前处理平台进行蛋白质酶解的pH为3-12；

所述强阳离子交换树脂和所述强阴离子交换树脂的质量比为(10-1):(1-10)。

2.根据权利要求1所述的蛋白质组学样品前处理平台，其特征在于，所述强阳离子交换树脂和所述强阴离子交换树脂的质量比为(7-3):(3-7)。

3.根据权利要求2所述的蛋白质组学样品前处理平台，其特征在于，所述强阳离子交换树脂和所述强阴离子交换树脂的质量比为(5-1):(1-3)。

4.根据权利要求3所述的蛋白质组学样品前处理平台，其特征在于，所述强阳离子交换树脂和所述强阴离子交换树脂的质量比为1:1。

5.根据权利要求1-4任一项所述的蛋白质组学样品前处理平台，其特征在于，所述固相萃取膜为C₁₈膜。

6.一种蛋白质的自动化反应系统，其特征在于，所述自动化反应系统包括如权利要求1-5任一项所述的蛋白质组学样品前处理平台。

7.根据权利要求1-5任一项所述的蛋白质组学样品前处理平台在细胞或者组织样品的蛋白质鉴定和定量蛋白质组学中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，将所述蛋白质组学样品前处理平台用于生物样本中样品的前处理。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，将生物样本中的蛋白质样品在强阳离子交换树脂和强阴离子交换树脂的混合填料上进行酶解，酶解完成后将生成的多肽转移到固相萃取膜上，进行洗脱。

10.一种蛋白质组学样品前处理方法，其特征在于，采用如权利要求1-5任一项所述的蛋白质组学样品前处理平台，包括如下步骤：

(1)活化强阳离子交换树脂和强阴离子交换树脂的混合填料，将蛋白样品上样到活化好的混合填料中，通过离心使蛋白质富集到混合填料上；

(2)预平衡固相萃取膜，依次加入相应的试剂和酶，完成蛋白质的还原和酶解；

(3)使用盐溶液将生成的多肽从强阳离子交换树脂和强阴离子交换树脂的混合填料转移到固相萃取膜上，使用有机溶剂将多肽洗脱下来。

11.根据权利要求10所述的前处理方法，其特征在于，步骤(1)所述蛋白样品来自于细胞和/或组织样品经裂解液裂解得到。

12.根据权利要求11所述的前处理方法，其特征在于，所述裂解液为十二烷基麦芽糖苷。

13.根据权利要求12所述的前处理方法，其特征在于，步骤(1)所述活化和上样的pH均为3-12。

14.根据权利要求13所述的前处理方法，其特征在于，步骤(1)所述活化和上样的pH均为6-8。

15.根据权利要求14所述的前处理方法，其特征在于，步骤(1)所述活化和上样的pH均为7.4。

16.根据权利要求10所述的前处理方法，其特征在于，步骤(1)所述强阳离子交换树脂和所述强阴离子交换树脂的质量比为(10-1):(1-10)。