[发明专利]一种包含细胞靶向抗体及Poly(I：C)的化合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种包含细胞靶向抗体及Poly(I:C)的化合物CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂-S-Ab，其特征在于：所述化合物以磷酸钙纳米颗粒为内核，内核表面接枝有PEI，内核表面吸附载有Poly(I:C)，内核外部为二氧化硅外壳，所述二氧化硅外壳通过环己烷-1-羧酸-3-磺基琥珀酰亚胺酯连接细胞靶向抗体，所述细胞靶向抗体为靶向肝窦内皮细胞的CD146抗体、靶向枯否细胞的F4/80抗体中的一种。

2.一种如权利要求1所述的包含细胞靶向抗体及Poly(I:C)的化合物CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂-S-Ab的制备方法，步骤包括：

S1、制备CaP/PEI：制备PEI-磷酸钙纳米颗粒；

S2、制备CaP/PEI/poly(I:C)：将步骤 S1 制备得到的PEI-磷酸钙纳米颗粒与 水溶的poly(I:C)混合，15~35℃下搅拌，得到负载有 poly(I:C)的PEI-磷酸钙纳米颗粒；

S3、制备CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂：将步骤S2所得CaP/PEI/poly(I:C)、四乙 氧基硅烷、氨水、乙醇充分混合，15~35℃下搅拌混合液 14~18 小时，离心分离 得到 CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂颗粒，再将CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂颗粒溶解于超纯水中；

S4、将CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂颗粒共价功能化，使CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂颗粒表面共价结合硫醇基团；

S5、制备CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂-S-Ab：将共价功能化后的 CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂颗粒加入至活化后的抗体中，所述抗体为靶向肝窦内皮细胞的CD146抗体、靶向枯否细胞的F4/80抗体中的一种 ， 3~5℃下 反 应20~28小 时，离心分离得到 CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂-S-Ab 纳米颗粒，将CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂-S-Ab纳米颗粒溶解于超纯水中；

步骤S4所述使 CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂颗粒表面共价结合硫醇基团的步骤包括：将三甲氧基甲硅烷溶于乙醇，再向其中加入溶解于超纯水中的 CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂颗粒，15~35℃下搅拌8~10小时，离心收集沉淀得到CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂-SH 颗粒，再将CaP/PEI/poly(I:C)/SiO₂-SH颗粒溶解于超纯水中；

步骤S5所述活化后的抗体，是使抗体与环己烷-1-羧酸-3-磺基琥珀酰亚胺酯在15~35℃下混合活化3-4小时所得。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤S1所述制备PEI-磷酸钙纳米颗粒的步骤包括：以体积比5 : 5 : 7的比例，向超纯水中注入水溶的乳酸钙、(NH₄)₂HPO₄和PEI，搅拌；所述水溶的PEI浓度为2g/L，水溶的乳酸钙浓度为18mmol/L、(NH₄)₂HPO₄浓度为10.8mmol/L；所述超纯水的用量为水溶的乳酸钙体积的四倍。