[发明专利]一种聚谷氨酸和人表皮生长因子纳米脂质体及其制备方法

说明书

本发明属于生物工程技术领域，公开了一种聚谷氨酸和人表皮生长因子纳米脂质体及其制备方法，该纳米脂质体包含高分子量的聚谷氨酸、低分子量的聚谷氨酸、人表皮生长因子和脂质体膜材料。本发明利用高、低分子量聚谷氨酸与人表皮生长因子复配，并利用ε‑聚赖氨酸抑菌作用制备了无防腐剂纳米脂质体，具有皮肤修复的加乘效果，大幅提高了活性成分的透皮性、皮肤吸收率，且性能稳定、使用配伍性好、包封率较高。

技术领域

本发明属于生物材料技术领域，具体涉及一种聚谷氨酸和人表皮生长因子纳米脂质体及其制备方法。

背景技术

作为一种新兴的药物载体，脂质体在药物制剂上已经有了比较广泛的应用。然而，由于普通脂质体的粒度过大，难以穿透细胞膜，故其在应用中不可避免地受到了很多的限制。因此，人们开始思考设计一种能突破这种局限性的新型脂质体，于是就诞生了纳米脂质体。纳米尺寸赋予了脂质体良好的穿透性能和特殊的靶向性，多的人将目光投向这种新型脂质体，并致力于将其引入医药和化妆品领域中，使其充分发挥治疗疾病和美容的功效。人们将这种新型脂质体命名为纳米脂质体，它是指在制备、储藏和运用过程中平均粒度大小均为纳米尺寸的脂质囊泡。

γ-聚谷氨酸，简称聚谷氨酸(γ-PGA)，又名纳豆胶，是由微生物分泌的谷氨酸同聚物，它由谷氨酸分子上α-氨基和另一分子上的γ-羧基通过酰胺键连接而成的一种类多肽物质，分子量从800Da-2000000Da不等。不同分子量γ-PGA功效存在明显差异，其中10000Da以下γ-PGA皮肤深层调节功效更好，具有抑制透明质酸酶和酪氨酸酶活性，促进皮肤内天然保湿因子和人表皮生长因子的再生；10000Da-2000000Daγ-PGA具有良好的保水锁水功效。γ-聚谷氨酸为类似蛋白结构的生物活性高分子材料，具有极佳的生物相容性、生物可降解性，并且其超强的保湿性能可以有效维持伤口湿润愈合环境，高效吸收伤口渗液，并促进细胞增殖和细胞分化，在人体内分解为谷氨酸，可完全被人体消化吸收参与组织修复再生。

人表皮生长因子(human epidermal growth factor,hEGF)是由53个氨基酸组成的多肽，分子量约为6200Da，能刺激细胞增殖、分化和迁移，在伤口愈合和器官发生中扮演着重要角色。它有三个二硫键，这些二硫键是它具有生物活性所必需的，如加入琉基试剂和尿素，则表皮生长因子失活，肽链上的巯基可在空气中自然氧化而完全恢复活性。人表皮生长因子是人体内分泌的一种重要的生长因子，极微量即能强烈促进皮肤细胞的分裂和生长，此外，它还能刺激细胞外一些大分子(如透明质酸和糖蛋白等)的合成和分泌，滋润皮肤，因此它既可作为化妆品的添加剂及用于面部整形手术，促进人皮肤的新陈代谢、减少皮肤畸形；也可在医药上治疗皮肤外伤、术后创口、褥疮、口腔溃疡和坏疽、以及放射治疗引起的皮炎等。它可以加速伤口和溃疡面的愈合。随着生物技术的发展，在细胞信号传导中起着重要作用的细胞因子受到越来越多的关注。

聚谷氨酸和人表皮生长因子是具有生物活性、生物相容性的皮肤修复材料，但其透皮性差、皮肤吸收率低，且使用条件苛刻、化妆品中很多配方成分会使其失活或分解，因此开发出新剂型，提高其透皮性、皮肤吸收率是亟待解决的问题。

中国专利申请201010604906.6公开了一种人表皮生长因子纳米脂质体，包括脂质体微囊和包裹于其中的人表皮生长因子。该专利采用磷脂和胆固醇为主要膜材，其类生物膜结构与皮肤相似，具有较好的表皮透过能力，制得的人表皮生长因子纳米脂质体可进一步制成护肤品，达到皮肤损伤的快速修复，皱纹的修复与祛皱，防晒、辐射、检验后的护理，敏感性皮肤护理、各类疤痕的去除修复等功效。

韩国专利申请20090020407公开了一种纳米脂质体，包括聚谷氨酸、透明质酸、植物甾醇、胆固醇、饱和卵磷脂等，该纳米脂质体能够增强皮肤保湿效果，并且该专利通过降低脂质体的大小，增强皮肤渗透性。

目前，仍然需要能够提高活性成分的透皮性、皮肤吸收率，且性能稳定、包封率较高的无防腐剂纳米脂质体。

发明内容