[发明专利]一种硅橡胶固载化糜蛋白酶材料及其制备方法和应用有效
申请号: | 201710645634.6 | 申请日: | 2017-08-01 |
公开(公告)号: | CN107460186B | 公开(公告)日: | 2021-01-05 |
发明(设计)人: | 杨洪;孙玉堂;林保平 | 申请(专利权)人: | 东南大学 |
主分类号: | C12N11/089 | 分类号: | C12N11/089;C12P21/06;C12N9/76 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 柏尚春 |
地址: | 210033 江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 硅橡胶 固载化糜 蛋白酶 材料 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种硅橡胶固载化糜蛋白酶材料,其特征在于:该硅橡胶固载化糜蛋白酶材料的化学通式为:
其中,A是糜蛋白酶,B是烯烃交联剂,x:y=3:(7~19);
其中:所述的烯烃交联剂B的分子结构式为以下任意一种:
其中n=10~20。
2.一种如权利要求1所述的硅橡胶固载化糜蛋白酶材料的制备方法,其特征在于:该方法通过硫-烯点击化学将糜蛋白酶单体用化学键合的方式连接在硅橡胶上,具体步骤如下:
1)修饰糜蛋白酶:以物质的量计,将1~2份的糜蛋白酶溶于pH为7.5~8.0的磷酸缓冲液中,之后加入含有150~200份十一烯酰氯的二氯甲烷溶液,反应后经透析、冷冻干燥得到经修饰的糜蛋白酶;
2)将经修饰的糜蛋白酶、烯烃交联剂、聚[3-巯丙基甲基硅氧烷]和光引发剂均匀混合后,在紫外环境下光致交联固载化,形成含有糜蛋白酶的硅橡胶,之后将该硅橡胶分割成颗粒状,干燥后得到硅橡胶固载化糜蛋白酶材料;
其中步骤1)所述反应的时长为12~24h,且用0.1~0.5mol/L的氢氧化钠溶液维持反应过程中溶液的pH在7.5~8.0之间;
步骤2)所述经修饰的糜蛋白酶、烯烃交联剂、聚[3-巯丙基甲基硅氧烷]和光引发剂之间的质量比为(0.8~1):(2.0~2.5):(0.8~1.2);
步骤2)所述干燥后得到硅橡胶固载化糜蛋白酶材料过程中干燥的温度为20~30℃,时长为6~12h。
3.如权利要求2所述的一种硅橡胶固载化糜蛋白酶材料的制备方法,其特征在于:步骤1)所述透析是指将反应后的溶液置于分子截留量为8000~12000的透析袋中,在去离子水中透析为12~24h,所述得冷冻干燥条件为-78~-60℃温度下,干燥24~48h。
4.如权利要求2所述的一种硅橡胶固载化糜蛋白酶材料的制备方法,其特征在于:步骤2)所述紫外环境下光致交联固载化的条件为在350~370nm紫外环境下光照3~5分钟。
5.如权利要求2所述的一种硅橡胶固载化糜蛋白酶材料的制备方法,其特征在于:所述的光引发剂为光致自由基引发剂,其分子结构为以下任意一种:
6.一种如权利要求1所述的硅橡胶固载化糜蛋白酶材料的应用,其特征在于:该材料作为催化剂用于催化动力学控制多肽合成。
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