[发明专利]一种鉴别肝螺杆菌的荧光定量PCR方法和荧光定量PCR试剂盒

权利要求书

1.一种鉴别肝螺杆菌的荧光定量PCR方法，其特征在于，将包含有PCR引物的反应体系进行荧光定量PCR反应；

所述PCR引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；

所述反应体系每20μL包括以下组分：10μM的上游引物0.8μL，10μM的下游引物0.8μL，SYBRPremix Ex TaqⅡ10μL，ROX Reference DyeⅡ0.4μL，样品DNA模版1μL，ddH₂O 7μL；

所述荧光定量PCR反应的程序包括：95℃预变性30s，95℃5s，52℃30s，72℃30s，40个循环，95℃15s，60℃1min，95℃15s；

当Ct值小于33时，检测出肝螺杆菌，当Ct值大于等于33时，未检测出肝螺杆菌。

2.一种荧光定量PCR试剂盒，包括：上游引物、下游引物、SYBR Premix Ex Taq II、ROX Reference Dye II和阳性质控品；

所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述上游引物的体积为200～600μL，下游引物的体积为200～600μL，SYBR Premix Ex Taq II的体积为3～7ml，ROX Reference Dye II的体积为100～300μL，阳性质控品的体积为1～3ml。

4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于，所述上游引物的浓度为10μM；

所述下游引物的浓度为10μM。