[发明专利]基于一测多评法的补骨脂药材检测方法

说明书

技术领域

本发明属于中药分析领域，涉及中药补骨脂药材的检测方法，具体涉及一种基于一测多评法的补骨脂药材检测方法。

背景技术

中药成分复杂多变，其药理活性和临床疗效往往是多种成分共同作用的结果。以单一成分或某一类成分的含量作为评价指标，通常无法全面、充分地反映中药的质量。而通过测定多种成分的含量来控制中药质量，则存在对照品稀缺、不稳定、成本高等诸多问题，给检测也造成较大困难，如果通过某一个成分的含量测定来同时测定多个或多种结构相似的药效物质的含量，可实现中药质量的有效控制。

一测多评法(QAMS)是中药领域多成分同步质量控制的新模式，通过测定某个稳定、廉价、易得的指标性成分，根据其与其他成分之间相关关系，计算各待测成分的含量，可有效解决中药多指标质量控制过程中对照品使用较多、成本高、难以供应等问题。一测多评法的原理为在一定线性范围内，特定成分的量(质量或浓度)与检测器的响应成正比，选用某一典型、易得、稳定的物质作为内参物(s)，建立该成分与其他待测成分(a，b，…，i，…)的相对校正因子(RCF，f_sa,f_sb,f_si)，计算公式为：(其中，A_s、A_i分别为内参物对照品s和待测成分对照品i的峰面积，W_s、W_i分别为内参物对照品s和待测成分对照品i的浓度)。根据QAMS进行含量测定时，先根据常规方法测定内参物(s)的浓度(C_s)，再结合相对校正因子(RCF)按下式计算待测成分的浓度：

补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，具有纳气平喘、温肾助阳、温脾止泻等功效，可用于治疗肾阳不足、腰膝冷痛、肾虚作喘、五更泄泻、遗尿遗精，外用还可治疗白癜风、斑秃。目前，补骨脂中已分离鉴定出40余种化合物，主要为呋喃香豆素类、黄酮类、单萜酚类成分。《中国药典》2015版载补骨脂的含量测定项指标为补骨脂素和异补骨脂素总含量，而其他活性成分如补骨脂苷、异补骨脂苷等在水煎液中也有较高含量，且在体内可快速吸收，并转化为补骨脂素、异补骨脂素，对其药效的发挥有关键作用，因而也应作为评价补骨脂药材质量的重要指标性成分。补骨脂素、异补骨脂素分别为补骨脂苷、异补骨脂苷的水解产物，具有相似的结构骨架。目前，国内外研究中有通过外标法直接进行补骨脂苷和异补骨脂苷的含量测定，也有将一测多评法用于补骨脂中其他成分如黄酮类的含量测定，但尚未见补骨脂中苯并呋喃苷类(补骨脂苷、异补骨脂苷)成分一测多评法的相关报道。而补骨脂苷、异补骨脂苷对照品也不易获得，制备成本较高，以其苷元为参照物应用一测多评法可实现同时测定补骨脂中多个指标成分的含量测定。

发明内容

本发明的目的是为克服现有技术存在的不足，提供一种基于一测多评模式的补骨脂药材检测方法，可较全面、系统地反映补骨脂药材中有效成分的含量。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

采用一测多评法，以补骨脂素为内参物，检测补骨脂药材中补骨脂苷、异补骨脂苷、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂甲素、补骨脂乙素、corylifol A、补骨脂酚的含量，实现补骨脂药材的质量控制，具体包括以下步骤：

(1)对照品溶液的配制：

分别精密称定补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂乙素、补骨脂二氢黄酮甲醚、corylifol A、补骨脂酚对照品适量，置于容量瓶中，加甲醇溶解并定容，摇匀，即得各对照品储备溶液。分别移取适量储备液于另一容量瓶中，加甲醇定容后摇匀，即得补骨脂混合对照品溶液。

(2)供试品溶液的配制：

称取一定量补骨脂药材粉末(过3号筛)，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入一定量溶剂提取。提取液离心后，过滤，取续滤液，即得。提取溶剂为甲醇。所述提取方式为超声40分钟。所述过滤采用的是0.45μm微孔滤膜。

(3)确定相对校正因子：