[发明专利]基于二氧化钛修饰多孔硅在线富集和检测S层蛋白的生物芯片传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于二氧化钛修饰多孔硅在线富集和检测S层蛋白的生物芯片传感器，其特征在于，由二氧化钛修饰的多孔硅为载体，通过微流控技术结合，利用A蛋白将S-层蛋白单克隆抗体定向固定于二氧化钛修饰的多孔硅表面制备得到。

2.一种权利要求1所述的生物芯片传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)多孔硅的制备：采用阳极氧化法将硅片制备得到多孔硅，并进行高温氧化处理；

(2)二氧化钛修饰多孔硅：将钛酸四丁酯、无水乙醇、三乙醇胺混合均匀，用旋涂法将其涂布于步骤(1)所得的多孔硅表面，接着对多孔硅进行高温氧化处理，该步骤重复2-3次；

(3)抗体的固定：将步骤(2)所得二氧化钛修饰的多孔硅固定于微流控装置，匀速泵入A蛋白溶液使其非共价吸附于多孔硅表面，接着泵入S-层蛋白单克隆抗体溶液，使其被A蛋白捕获，通过A蛋白定向固定抗体的方法将S-层蛋白单克隆抗体固定于二氧化钛修饰的多孔硅表面，得到生物芯片传感器。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述的钛酸四丁酯、无水乙醇、三乙醇胺体积比5-6:30:1-2。

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述的钛酸四丁酯、无水乙醇、三乙醇胺的混合溶液按质量体积比100-120：50(ul/mg)滴在多孔硅表面。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述微流控装置由样品池和恒流泵构成；二氧化钛修饰的多孔硅固定于样品池底部使液体流经多孔硅表面，由恒流泵提供稳定的流速。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述A蛋白溶液浓度为0.1-0.2mg/mL；S-层蛋白单克隆抗体溶液浓度为50-55μg/mL。

7.一种权利要求1所述的生物芯片传感器在线富集和检测S层蛋白中的应用。

8.根据权利要求7的应用，其特征在于，所述生物芯片传感器在线富集和检测嗜酸乳杆菌中S层蛋白。

9.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于，所述应用的具体步骤为分别配置不同浓度的S-层蛋白溶液，由低浓度到高浓度行检测；首先将低浓度的S-层蛋白加入生物芯片传感器中，加入PBS溶液待多孔硅表面的光学厚度不再上升并平衡后，洗掉结合在抗体上的S-层蛋白以进行下一个浓度蛋白的检测；接着通入PBS溶液直至光学厚度平衡，然后进行下一个浓度蛋白的检测，依次循环上述操作。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述多孔硅表面的光学厚度通过光纤光谱仪测量。