[发明专利]一种用于富集、净化、检测AFB1

权利要求书

1.一种用于富集、净化、检测AFB₁的修饰反蛋白石光子晶体微球，其特征在于，由反蛋白石光子晶体微球作为免疫亲和材料的载体，对微球进行羟基化修饰、氨基修饰和醛基修饰，再在微球表面修饰固定上AFB₁单克隆抗体制成；

所述的修饰反蛋白石光子晶体微球的制备方法：

（1）反蛋白石光子晶体微球的制备：将二氧化硅和聚苯乙烯混合纳米乳液作为水相，将甲基硅油作为油相，使油相截断水相形成油包水型微球；将油包水型微球加热至水分蒸发完全，干燥固化；再清洗高温煅烧；降至室温，去除聚苯乙烯微球模板，留下有序的反蛋白石光子晶体微球；

（2）反蛋白石光子晶体微球表面的修饰：将步骤（1）得到的反蛋白石光子晶体微球通过进行表面羟基化修饰，再对微球表面进行氨基修饰，最后对微球表面进行醛基修饰；

（3）抗体的固定：通过化学键合方法将AFB₁-抗体固定于经过步骤（2）修饰得到的微球表面，得到修饰反蛋白石光子晶体微球。

2.一种权利要求1所述的修饰反蛋白石光子晶体微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）反蛋白石光子晶体微球的制备：将二氧化硅和聚苯乙烯混合纳米乳液作为水相，将甲基硅油作为油相，使油相截断水相形成油包水型微球；将油包水型微球加热至水分蒸发完全，干燥固化；再清洗高温煅烧；降至室温，去除聚苯乙烯微球模板，留下有序的反蛋白石光子晶体微球；

（2）反蛋白石光子晶体微球表面的修饰：将步骤（1）得到的反蛋白石光子晶体微球通过进行表面羟基化修饰，再对微球表面进行氨基修饰，最后对微球表面进行醛基修饰；

（3）抗体的固定：通过化学键合方法将AFB₁-抗体固定于经过步骤（2）修饰得到的微球表面，得到修饰反蛋白石光子晶体微球。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述羟基化修饰为将反蛋白石光子晶体置于食人鱼溶液，室温震荡；清洗后烘干，使微球表面修饰上羟基。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述氨基修饰为将羟基化修饰的反蛋白石光子晶体置于含APTMS的甲苯溶液，震荡后清洗，使微球表面修饰上氨基。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述醛基修饰为将氨基修饰的反蛋白石光子晶体置于戊二醛水溶液中，室温震荡，待微球由白色变为橘红色反应完毕，反应完毕清洗；使微球表面修饰上醛基。

6.一种权利要求1所述的修饰反蛋白石光子晶体微球在富集、净化、检测AFB₁中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的修饰反蛋白石光子晶体微球在富集、净化、检测AFB₁标准品或者含AFB₁农产品样品中的应用。

8.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述富集过程为向修饰反蛋白石光子晶体微球加入不同浓度的AFB₁标准品或者含AFB₁农产品样品进行抗原抗体结合反应。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述农产品样品为加入AFB₁甲醇溶液的农产品样品，包括大米、小麦或玉米。

10.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述净化、检测过程为将抗原抗体结合的修饰反蛋白石光子晶体微球用甲醇进行AFB₁洗脱，洗脱液吹干后进行衍生，衍生化后吹干，加入甲醇溶液，使用HPLC检测荧光值。