[发明专利]拟草果总黄酮提取物的质量检测方法

说明书

本发明涉及一种中药提取物的制备和质量检测方法，具体涉及一种拟草果总黄酮提取物的制备和质量检测方法，它是将拟草果的干燥果实经粉碎、醇提，甲醇或乙醇回流提取，浓缩，加水混悬，大孔吸附树脂柱层析洗脱（乙醇‑水系统），浓缩，真空干燥后，制得拟草果总黄酮提取物，该拟草果总黄酮提取物的制备方法合理、稳定、生产周期短，适合工业化生产，本发明采用紫外‑可见分光光度法、高效液相色谱一测多评法以及面积归一化法测定拟草果总黄酮提取物中拟草果总黄酮的含量，方法准确、稳定、操作简单，本发明制备得到的拟草果总黄酮提取物具有抗炎、抗菌等药理作用。

技术领域

本发明涉及一种中药提取物的制备和质量检测方法，具体涉及一种拟草果总黄酮提取物的制备和质量检测方法。

背景技术

拟草果又称白草果、广西草果，为姜科豆蔻属植物拟草果（Amomum paratsao-ko S.Q.Tong et Y.M.Xia）的干燥成熟果实，在广西等地区有大面积的栽培。拟草果在广西壮族民间作为草果的代用品用作提香或者药用，临床用于治疗脘腹胀满冷痛、反胃呕吐、积食、痰饮、疟疾等症。然而迄今为止除了挥发油成分（【题名】拟草果挥发油的GC-MS分析【作者】覃兰芳，黄云峰，胡琦敏，等，广西中医药研究院【刊名】中医药导报，2014(11): 23-25，【题名】广西红草果与白草果挥发油的GC-MS分析【作者】黄云峰，覃兰芳，胡琦敏，等，广西中医药研究院【刊名】现代中药研究与实践，2014(02): 22–24）外，拟草果的非挥发性化学成分、药理活性、安全性等一系列问题并未见相关研究报道。

拟草果在广西有着广泛的栽培种植和长期的民间使用基础，而目前关于其药学方面的研究较少，对拟草果的开发利用相对滞后。随着药学科技的发展，精制的天然植物提取物低毒高效的特性受到人们越来越多的青睐，现代药理研究亦发现拟草果提取物具有抗炎、抗菌等药理作用，因此研发一种拟草果总黄酮提取物的制备方法和质量检测方法是有必要的，利于开发拟草果新的药用途径，并为药材资源的充分利用及提高其应用价值提供科学的依据。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有抗炎、抗菌等药理作用的拟草果总黄酮提取物的制备方法，以及拟草果总黄酮提取物的质量检测方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种拟草果总黄酮提取物的制备方法，该方法包括以下步骤：

（1）甲醇或乙醇加热回流提取：

①拟草果干燥果实，粉碎，按重量加5－15倍量体积浓度为70－100％的甲醇或乙醇；

②在温度为60-90℃下加热回流提取3－5次，每次0.5－2.0 h，滤过，合并滤液；

③滤液回收甲醇或乙醇，并浓缩至无醇味，加水稀释至浓度为0.04－0.067g生药量/ml的拟草果提取液，待上柱用；

（2）大孔吸附树脂分离纯化：

①选择弱极性的HP-20或AB-8大孔吸附树脂；

②吸附：上柱拟草果提取液浓度为0.04-0.06 g生药量/ml，上柱拟草果提取液体积为填充大孔吸附树脂体积的10-25倍，上柱流速为1-4 BV/h；【注：BV/h表示柱内单位时间（h）流经单位体积树脂平均液量】；

③洗脱：洗脱剂为体积浓度30-90%的乙醇，洗脱剂用量为填充大孔吸附树脂体积的10-20倍，洗脱流速为1-3BV/h，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干，50-60 ℃真空干燥，即得拟草果总黄酮提取物。

本发明拟草果总黄酮提取物的质量检测方法包括如下含量测定方法中的一种或多种。

1、拟草果总黄酮的含量测定（紫外-可见分光光度法）