[发明专利]生物安全变栖克雷伯氏菌及其在1;3-丙二醇生产中的应用有效
| 申请号： | 201710680310.6 | 申请日： | 2017-08-10 |
| 公开（公告）号： | CN107384975B | 公开（公告）日： | 2019-09-24 |
| 发明（设计）人： | 韩冰 | 申请（专利权）人： | 张家港美景荣化学工业有限公司 |
| 主分类号： | C12P7/18 | 分类号： | C12P7/18;C12N1/21;C12R1/22 |
| 代理公司： | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人： | 韩蕾;姚亮 |
| 地址： | 215600 江苏省苏州市张*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 克雷伯氏菌 丙二醇 发酵甘油 生物安全 生产 发酵工艺 基因表达 产率 构建 基因工程手段 微生物发酵 高效生产 基因工程 菌种 应用 优化 | ||
1.变栖克雷伯氏菌F2R9T的衍生菌株在生产1,3-丙二醇中的应用；其中，变栖克雷伯氏菌F2R9T的衍生菌株为其tqsA基因表达增强的菌株；
所述变栖克雷伯氏菌F2R9T的衍生菌株是通过将变栖克雷伯氏菌F2R9T的tqsA基因的启动子替换为表达强度高的启动子而得到的；
所述表达强度高的启动子为dhaD基因的启动子。
2.一种变栖克雷伯氏菌F2R9T衍生菌株，该菌株的tqsA基因表达增强；
该菌株是通过将变栖克雷伯氏菌F2R9T的tqsA基因的启动子替换为表达强度高的启动子而得到的；所述表达强度高的启动子为dhaD基因的启动子。
3.一种生产1,3-丙二醇的方法，该方法包括：
步骤(1)，将变栖克雷伯氏菌F2R9T的衍生菌株接种于含有甘油的种子培养基中，摇瓶培养获得种子培养液；
步骤(2)，将种子培养液接种于含有甘油的发酵培养基中，培养得到1,3-丙二醇；
其中，变栖克雷伯氏菌F2R9T的衍生菌株为权利要求2所述的菌株。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述种子培养基的组成包括：以1L种子培养基计，包括20g的甘油、3.2g的K2HPO4·3H2O、1.2g的KH2PO4、2.85g的NH4Cl和2g的酵母膏。
5.根据权利要求4所述的方法，其中，摇瓶培养的条件为32℃、转速为100rpm、种子培养基的pH为7.0，培养12h。
6.根据权利要求3-5任一项所述的方法，其中，所述发酵培养基的组成包括：以1L发酵培养基计，包括20g的甘油、3.2g的K2HPO4·3H2O、1.2g的KH2PO4、2.85g的NH4Cl、0.28g的Na2SO4、0.1g的MgSO4·7H2O、0.42g的柠檬酸、2g的酵母膏和0.3mL的微量元素溶液。
7.根据权利要求6所述的方法，其中，发酵培养的条件为32-35℃、转速为100-200rpm、通气量为0.5-0.8vvm、发酵培养基pH值为6.5-6.8，发酵12-36h。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，发酵培养基的pH值通过碱溶液进行调节。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，发酵第4-32小时，每升发酵液中，每小时补加10-40g的甘油。
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