[发明专利]碱提法高效提取植物硒蛋白的方法

说明书

本发明公开了碱提法高效提取植物硒蛋白的方法，包括以下步骤：(1)前处理；(2)提取、沉淀：将发酵后的浆液、促进剂和碱性溶液放入反应器中，在80～95℃下回流反应10～12h，然后以1～3mL/min的速度加入4倍发酵后的浆液体积的冰丙酮，置于‑27～‑17℃的环境中，在超声波的声能密度为15～25W/mL的辅助处理条件下，放置3～5h以进行硒蛋白沉淀，然后离心10～15min，最后取出沉淀物并进行喷雾干燥后，得到硒蛋白成品。本发明公开的碱提法高效提取植物硒蛋白的方法，不仅能够减少植物硒蛋白的流失率，提高植物提取率的同时，还能提高植物硒蛋白的纯度，具有广大的市场推广价值。

【技术领域】

本发明涉及植物硒蛋白的提取领域，特别涉及碱提法高效提取植物硒蛋白的方法。

【背景技术】

硒是人和动物的必需微量元素之一，硒可以提高免疫力，能加速免疫球蛋白及抗体产生。保护心血管与心肌，降低心血管病与心绞痛的发生率。在抗氧化抗衰老与抗癌防癌等方面有多种作用，并具有降低重金属毒害等特殊生理功能。被国内外科学家们誉为人类“抗癌之王、长寿元素、生命的火种、天然解毒剂、心脏守护神”。

硒可分为有机硒和无机硒，无机硒主要以硒酸盐、亚硒酸盐为主，占硒总量的8％，一般具有较强的毒性。有机硒可分为大分子硒和小分子硒化物，占硒总量的80％以上，一般以硒代氨基酸和硒蛋白的形式存在，在生物体内发挥作用的主要是有机硒化物。在植物体内，硒积聚能力较强的植物硒结合蛋白较少，所以硒可能作为含硫氨基酸代谢中间产物类似物存在。在非积聚植物中，硒与蛋白质往往比较多，而且主要以硒代蛋氨酸存在，也有硒代半胱氨酸存在。研究发现在水稻硒蛋白中存在着两种硒结合态：硒代氨基酸和硒代半胱氨酸。

大米的成分有脂类、水分、淀粉和蛋白质，其中淀粉和蛋白质大米的两大主要成分，其含量分别约为62-86％和9-15％之间。按蛋白溶解性的不同,大米蛋白质可分为4种类型：水溶性白蛋白、盐溶性球蛋白、碱溶性谷蛋白和醇溶蛋白。其中谷蛋白和醇溶蛋白为主要成分，各自占69％和11.5％，清蛋白和球蛋白各占9％和10.5％。硒蛋白中的硒主要以硒代甲硫氨酸存在，要准确检测其中硒含量，必须找到合适的硒蛋白提取方法，提取出硒蛋白。

目前硒蛋白主要提取方法有溶剂提取法、柱分离技术、生物学方法、辅助提取技术等。其中有机溶剂提取法中应用最广的是碱提法，但是碱提法存在着硒蛋白流失严重的问题。因此，研究一种具有高效提取硒蛋白的方法具有广阔的市场推广价值。

【发明内容】

本发明目的在于提供碱提法高效提取植物硒蛋白的方法，本发明先对富硒大米进行发酵的前处理，使得富硒大米的结构物质进行初步的降解，有利于后续的植物硒蛋白的溶出；然后在碱性溶液环境中进行提取处理；最后在冰丙醇的沉淀作用下，辅助以超声波的技术手段，可以减少植物硒蛋白的流失率，进而提高植物硒蛋白的提取率。本发明公开的碱提法高效提取植物硒蛋白的方法，不仅能够减少植物硒蛋白的流失率，提高植物提取率的同时，还能提高植物硒蛋白的纯度，具有广大的市场推广价值。

为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：碱提法高效提取植物硒蛋白的方法，包括以下步骤：

(1)前处理：按重量份数计，将150～200份富硒大米放在800～1000份去离子水中浸泡8～12h后，取出研磨成浆，加入1～3份酵母，将全部材料放入发酵罐中，在25～35℃下发酵2～3天，然后在40～52℃下液化3～6h，得到发酵后的浆液；

(2)提取、沉淀：按重量份数计，将20份发酵后的浆液、1份促进剂和100～125份碱性溶液放入反应器中，在80～95℃下回流反应10～12h，然后以1～3mL/min的速度加入4倍发酵后的浆液体积的冰丙酮，置于-27～-17℃的环境中，在超声波的声能密度为15～25W/mL的辅助处理条件下，放置3～5h以进行硒蛋白沉淀，然后在2～5℃下以10000～20000r/min的速度离心10～15min，最后取出沉淀物并进行喷雾干燥后，得到硒蛋白成品。